去甲斑蝥素抑制大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的研究.pdf

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1、--癌变■变襄变第26卷第6期圄■圈Protectiveeffectof去甲斑蝥素抑制大norcantharidinonischemia_鼠心肌细胞缺血再repetlIus,■onl●nl●uryI■n灌注损伤的研究_--ratcardiomyocytes崔宝弟，武扬，孙震晓(北京中医药大学中药学院生物制药系，北京100102)cUIBao-~，WUYan，SUNZhen-xiao(Depar／mentofBiopharmaceutics,SchoolofChinesePharmacology,BeijingU

2、niversityofChineseMedicine,Beijing100102,Chma)【摘要】目的：探讨去甲斑蝥素(NCTD)抗大鼠心肌缺血再灌注损伤(IRI)的作用及其机制。方法：以大鼠乳鼠原代心肌细胞和大鼠心肌细胞系H9c2为研究对象，采用M33"法检测不同浓度(O．01、0．05、0．1、0．5、1和5txg／mL)NCTD预处理对IRI的心肌细胞活力的影响；流式细胞术检~IJNCTD预处理对IRI的心肌细胞凋亡的影响；Giemsa染色及台盼蓝染色观察NCTD预处理对IRI的心肌细胞形态的影响；We

3、sternblot检~IJNCTD预处理对IRI心肌细胞中程序性细胞死亡因子4(Pdcd4)表达情况；RT-qPCR检~IJNCTD预处理对IRI心肌细胞microRNA一21(miR一21)的表达情况。结果：NCTD对原代心肌细胞和H9c2心肌细胞IRI具有抑制作用<0．01)；通过NCTD预处理可以抑制IRI造成的细胞死亡并抑制IRI导致的Pdcd4蛋白表达上调及miR一21下调。结论：NCTD在0．1～0．5~g／mL浓度下可以抑制心肌细胞IRI，miR一21一Pdcd4信号通路参与心肌细胞IRI及NCT

4、D抑制IRI的作用。【关键词】去甲斑蝥素；心肌细胞；缺血再灌注损伤；程序性细胞死亡因子4；microRNA一21中图分类号：R966，R285文献标志码：A文章编号：1004—616X(2014)06—0423—05doi：10．3969~．issn．1004—616x．2014．06．005lABSTRACT]OBJECTIVE：Toexploretheeffectsofnorcantharidin(NCTD)onmyocardialischemia—reperfusioniniuryfIRI1anditsp

5、ossiblemechanismsinrats．METHODS：TheeffectofdiferentconcentrationsofNCTDonprimaryratcardiomyocytesandH9c2cellswasexaminedbyMTTassay．TheapoptosisefectofNCTDpretreatment0nIRIisdetectedbyflowcytometry．Ischemia—reperfusionmyocardialcellmorphologyofNCTDpretreatmen

6、twasexaminedbyGiemsaandTrypanbluestaining．Theexpressionofprogrammedcelldeathfactor4fPdcd4)inNCTD—pretreatedischemia—reperfusionmyocardialcellwasexaminedbyWesternblot．TheexpressionofmicroRNA一21fmiR一21)inNCTD—pretreatedischemia—reperfusionmyocardialcellwasasse

7、ssedbyRT—qPCR．RESULTS：TheIRIofprimaryratcardiomyocytesandH9c2wasinhibitedbyNCTD<0．01)．CelldeathcausedbyIR1wassignificantlyinhibitedbyNCTD．NCTDcouldeffectivelyinhibitPdcd4proteinuD—regulationandmiR一21down—regulationcausedbyIRIinratcardiomyocytes．CONCLUSION：My

8、ocardialIRIcouldbeinhibitedbyNCTDtreatmentinconcentrationof0．1-0．5g／mL，andmiR一21一Pdcd4signalingpathwaysmayparticipateinmyocardialIRIandtheinhibitionofIRIbyNCTD．／'KeYWORDS]norcantharidin；ratcardi