清髓方灌洗治疗大鼠慢性骨髓炎疗效观察.pdf

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1、·1122·GuizhouMedicalJournal，2014，VoI_38，No．12·实验研究·清髓方灌洗治疗大鼠慢性骨髓炎疗效观察吴红王岚邵海波(1．贵阳中医学院第二附属医院，贵州贵阳550003；2．贵阳中医学院，贵州贵阳550002)中图分类号：R274文献标识码：B文章编号：1000—744X(2014)121122—02doi：l0．3969／j．ISSN．1000—744X．2014．12．030慢性骨髓炎属祖国医学“附骨疽”范畴，发病率SD大鼠，雌雄各半，适应性喂养1周。禁食12h较高，最常见的致病菌为金黄色

2、葡萄球菌u]。由于后，用水合氯醛麻醉(10mg／100g体质量进行大鼠其复杂的病理改变，以及金黄色葡萄球菌中多重耐腹腔腹膜下注射麻醉)，右后肢膝前区剪毛、消毒，屈药菌珠耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的产生曲膝关节用8号针头由胫骨平台前中1／3交界处和检出率不断上升_2]，使慢性骨髓炎难于治疗。本平行胫骨干纵轴略偏后朝胫骨骨髓腔方向钻孔刺研究通过动物实验对清髓方治疗大鼠慢性骨髓炎的入，有突破感，放出少量骨髓；另取8号针头经前孔疗效进行了观察。刺入胫骨髓腔内，注入耐甲氧西林金黄色葡萄球菌混悬液(按0．01mL／20g体质量计算

3、注入量)与l材料和方法0．03mL5鱼肝油酸钠的混合液，退出针头，对针1．1材料健康SD大鼠50只(昆明实验动物有孔稍加压迫，造模后观察局部反应情况。2周后，局限公司提供，合格证书：医动字第O2—49—2号)，雌雄部红肿、窦道形成、流脓，X线显示骨膜增生，皮质增各半，雄性体质量大鼠183～232g，雌性大鼠181～厚，密度增加或为包壳，其内有死骨及死腔形成。203g；清髓方及其灌洗提取液(组方：黄芩、黄柏、当1．5实验方法造模成功的36只SD大鼠随机分归、JIl芎、虎杖、白芷、紫草、血竭、厚朴、陈皮、牛膝、成3组：清髓方组、庆大

4、霉素组、空白组，每组动物红花、桃仁)，由贵阳中医学院附属第二医院制剂室l2只。将各组大鼠做闭式灌洗手术，术中将两根引同批制成，含生药量0．05g／mI。实验试剂由贵阳流管远端开放6个侧孔后平行置于胫骨开窗处，由医学院组织生化实验室、贵阳医学院微生物实验室切口近端机远端皮肤切口，将引流管近端及远端穿提供，或由贵阳市化学试剂批发公司一次购入。出皮肤，丝线结扎固定，外用薄金属片保护，防止大1．2金葡菌菌体抗原制备MRSA悬液将菌种在鼠噬咬。肉汤培养基中传代一次，配成1×10。cfu／mL细菌清髓方组，以5清髓方提取液灌洗；庆大霉素悬液

5、，取适量菌液注入5只小鼠腹腔以恢复菌种毒组，以庆大霉素24万U加入500mL生理盐水中灌力；24h后将小鼠处死，取腹腔液接种于普通培养洗；生理盐水组，以生理盐水灌洗。以上各组手术后基上，37-C培养24h后，在肉汤培养基中再次传代3d内，4次／d，每次5mL／只，10mI／rain；3d后一次，造模前用比色法配成5×l0cfu／mLMRSA2次／d，每次5mL／只，10mL／min；连续治疗一个悬液。月。1．3体外抑菌实验体外抑菌试验：将传代后的菌1．6数据处理用SPSS17．0统计软件对所有的种在平皿培养基上密集划线，采用纸片

6、法进行提取数据进行统计学处理。临床疗效组间比较，采用秩液的抑菌试验，同时用庆大霉素药敏纸片(上海伊华和检验，组内采用t检验，安全性比较两组之间采用临床医学科技公司生产，沪G／95卫药生证字第盯Y检验，以评定疗效。号，10g／片)做抑菌试验37。C温箱培养24h，分别测其抑菌圈直径，求均值。2结果1．4骨髓炎模型制作参照沈霖等【3法，取5O只2．1体外抑菌实验清髓方提取液药敏纸片周围无明显抑菌圈，说明清髓方提取液体外无明显抑菌注：本课题系贵州省科学技术厅贵阳中医学院科学技术联合资金项目[黔科合中药字(2011)LKZ7OO1号]作

7、用；庆大霉素制片抑菌圈为16mm。贵州医药2014年12月第38卷第12期表1治疗后骨X光片对比患骨拍X光片，曝光条件：80KV，50mA，0．06S。按照刘宗义等]，漫性骨髓炎骨X线诊断分型标准，由三位放射科医师盲法评定治疗后X光片，分为轻、中、重三级。见表1。2．3白细胞数量变化三组动物均于治疗前及治注：与空白组比较，P<0．05，P<0．01；与清髓方组比较，P>0．05疗后lOd、20d、30d取尾血白细胞计数，以其均值(±s)进行治疗前后及组间两两比较。见表2。2．2治疗后骨X光片对比三组动物于治疗后取表2白细胞数量变

8、化(n／mm。，±s)注：白细胞数量变化情况清髓方组明显好于庆大霉素组与生理盐水组，p