蛋白质翻译及翻译后修饰.ppt

《蛋白质翻译及翻译后修饰.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第15章蛋白质翻译ProteinBiosynthesis(Translation)本章主要内容翻译系统蛋白质生物合成的过程多肽链翻译后的修饰蛋白质的到位基因在原核和真核细胞中最终得到表达原核真核原料氨基酸，20种mRNA是合成蛋白质的“蓝图（或模板）”tRNA是原料氨基酸的“搬运工”rRNA与多种蛋白质结合成核糖体,作为合成多肽链的“装配机（操作台）”1蛋白质的翻译系统蛋白质翻译系统示意图mRNA是遗传信息的载体（载有遗传密码，geneticcode），是合成蛋白质的蓝图（模板），它以一系列三联体密码子（codon）的形式从DNA转录

2、了遗传信息。每个密码子代表一个氨基酸。mRNA占细胞总RNA的5-10%，不稳定，寿命短。原核的mRNA是多顺反子;真核的mRNA是单顺反子。1.1信使RNA(mRNA)遗传密码上世纪60年代，利用均聚核苷酸实验，破译了遗传密码。遗传密码为三联体（每三个碱基代表一个氨基酸），由5’到3’阅读，无间断。即使在少数重叠基因（如病毒）中，其开放阅读框架（openreadingframe,ORF）仍按此原则。起始密码为AUG,终止密码为UAA，UAG和UGA。5’AUGCCAUGCACCCGGGUU…………..CAAUAG3’ProCysTh

3、rArgVal…………..Gln密码有简并性（degeneracy），即一个氨基酸可由几个密码子表示；通用性，大多数生物使用同样的遗传密码，但也会有所偏爱。遗传密码表原核tRNA有30-40种，真核有50-60种，含70-90个核苷酸，并有多种稀有碱基。tRNA是最小的RNA，占细胞总RNA的15%左右，其功能是搬运氨基酸和解读密码子。tRNA具有“四环一臂”和“三叶草”形的典型结构。注意：3’端CCA氨基酸受位和反密码子环1.2转运RNA(tRNA)tRNA的结构—“四环一臂”倒L形的三级结构tRNA的功能是解读mRNA上的密码子和

4、搬运氨基酸。tRNA上至少有4个位点与多肽链合成有关：即3’CCA氨基酸接受位点、氨基酰-tRNA合成酶识别位点、核糖体识别位点和反密码子位点。每一个氨基酸有其相应的tRNA携带,氨基酸的羧基与tRNA的3’CCA-OH以酯键结合。而tRNA的反密码子可以与mRNA上相应的密码子互补结合,以使氨基酸正确“对号入座”（因为密码子的序列对应于多肽链上的氨基酸序列）。密码子与反密码子的配对方式变偶性或摆动性——反密码子5’端的碱基与密码子的第三位配对不严格核糖体是rRNA与几十种蛋白质的复合体，有大、小两个亚基构成。含有合成蛋白质多肽链所必

5、需的酶、起始因子（IF）、延伸因子（EF）、释放因子（RF）等。原核的核糖体（70S）=30S小亚基+50S大亚基30S小亚基:16SrRNA+21种蛋白质50S大亚基:23S，5SrRNA+34种蛋白质真核的核糖体（80S）=40S小亚基+60S大亚基40S小亚基:18SrRNA+33种蛋白质60S大亚基:28S，5.8S，5SrRNA+45种蛋白质1.3核糖体（ribosome）与核糖体rRNA沉降系数S生物大分子在离心场中沉降，受到三种力的影响，它们是离心力，浮力和摩擦力。物质在单位离心力场的沉降速度是个定值，称为沉降系数（se

6、dimentationcoefficient）。蛋白质、核酸等的沉降系数在1X10-13到200X10-13秒之间。为方便将10-13秒作为一个单位，称Svedberg单位，用S表示。其数值不仅与物质分子的质量有关，也与分子的形状有关。rRNA只有4-5种，但占细胞RNA的大部分。图为原核生物的两种RNA16SrRNA和5SrRNA的结构核糖体的结构核糖体有4个基本功能1.容纳mRNA，并能沿着mRNA由5’——3’移动，由tRNA解读其密码；2.氨基酰位点（A位点），可结合氨基酰-tRNA（AA-tRNA）；3.肽酰基位点（P位点）

7、，可结合肽酰基-tRNA（肽-tRNA）；4.脱氨基酰tRNA的出口位(E位点);5.肽酰基转移酶中心，是形成肽键的位点等。所有参与合成多肽链的氨基酸都要激活，并由数十种高度专一的氨基酰-tRNA合成酶催化。该酶由两个识别位点，它们能识别特定的氨基酸和选择其所对应的tRNA，使两者连接起来（利用ATP）。反应如下：氨基酸的羧基与tRNA的3’端CCA-OH以酯键相连，因此其氨基是自由的。2蛋白质的生物合成过程2.1氨基酸的活化氨基酸与tRNA的连接方式翻译起始时，第一个氨基酸一般是甲硫氨酸，其氨基要甲酰化成为甲酰甲硫氨酸，予以保护。甲

8、酰FH4甲酰基MettRNAfmetfMet-tRNA合成酶fMet-tRNA酯键首先IF3、IF1帮助30S小亚基与mRNA结合，IF2和GTP帮助甲酰甲硫氨酸-tRNA与AUG配对，接着IF3脱离，形成30S起始复合