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1、第37卷第1期中国预防兽医学报VO1.37.NO.12015年1月ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicineJan.2015doi:10.3969~.issn.1008-0589.2015.01.05金黄色葡萄球菌对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞PDGF—BBmRNA及蛋白表达的影响吴建美,王凤龙,丁玉林,毕艳楠,王一,王金玲,莫内,赵占宽(内蒙古农业大学兽医学院,内蒙古呼和浩特010018)摘要:为研究金黄色葡萄球菌(S.aureus)对奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)中PDGF.BBmRNA及
2、蛋白表达的影响,本研究采用热灭活的不同浓度的S.au/'e/./s菌液(0、10、10、10cfu/mL)作用于BMEC,分别在不同时间点(6h、12h、24h、48h)利用荧光定量PCR和westemblot方法检测PDGF.BBmRNA及其蛋白的相对表达量。结果显示,不同浓度茵液处理组的PDGF.BBmRNA相对表达量随着作用时间延长表达量升高(p<0.05)。6h处理组随着菌液浓度的升高,PDGF.BBmRNA的相对表达量呈升高趋势;12h处理组随着茵液浓度的升高,PDGF.BBmRNA的相对表达量呈降低趋势;24h和48h处理
3、组10cfu/mL茵液处理组PDGF.BBmRNA相对表达量最高(p<0.05)。同时,各时间点不同浓度菌液处理组PDGF.BB蛋白的相对表达量和mRNA表达基本一致。本研究表明,热灭活的S.au1"eus能够促进BMECPDGF.BBmRNA和蛋白的表达。关键词:金黄色葡萄球菌;奶牛乳腺上皮细胞;PDGF.BB中图分类号:$852.61文献标识码:A文章编号:1008.0589(2015)01.0019-04TheefectofStaphylococcusaureusonPDGF—BBmRNAexpressionandprotein
4、secretioninbovinemammaepithelialcellsculturedinvitroWUJian—mei,WANGFeng-long*,DINGYu-lin,BIYan-nan,WANGYi,WANGJin—ling,MONei,ZHAOZhan—kuan(CollegeofVeterinaryMedicine,InnerMongoliaAgriculturalUniversity,Hohhot010018,China)Abstract:Theaimofthisstudywastoexploretheefectof
5、heat—inactivatedStaphylococcusaureusontheexpressionofPDGF-BBmRNAandproteininbovinemammaryepithelialcells.Inthisstudy.themammaryepithelialcellscultured面vqtrowereexposedtotheheat-inactivatedS.aureusat10cfu/mL,10cfu/mLand10。cfu/mL,respectively,andthetotalRNAandproteinweree
6、xtractedfromthecellsat6,12,24and48hoursrespectivelyforexaminationsbyreal—timeRT—PCRandwesternblot.TheresultsshowedthatthePDGF—BBmRNAexpressionsinallcellstreatedwithdiferentconcentrationofbacteriaweresignificantlyhigherthanthatincontrolcellsateverytimepoint(mo.05).Furthe
7、rmore,theproteinsecretionofPDGF—BBintreatedcellswasalsosignificantlyhigherthanthatincontrolcells.Inconclusion,theresultsindicatedthatheat—inactivatedS.aureusup-regulatedtheexpressionofPDGF—BBmRNAandproteininbovinemammaryepithelialcells.Keywords:Staphylococcusaureus;bovi
8、nemammaryepithelialcells;PDGF-BB*Correspondingauthor收稿日期:2014.08.26基金项目:国家自然科学基金(31460642)作者简介:吴建美(1989.),女,内蒙
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