胶原补片上生长因子释放及对人骨髓干细胞增殖与分化的影响.pdf

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1、中国组织工程研究第18誊笫52期2014—12—17出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchDecember17,2014VoL18,No．52WWW．CRTER．org胶原补片上生长因子释放及对人骨髓干细胞增殖与分化的影响啜俊波’，康凯’，孙露’，曲辉，蔡俊’，陈克功’，谢宝栋’，蒋树林’，田海’，李仁科’(哈尔滨医科大学附属二院，’心血管外科，哈尔滨医科大学心肌缺血机理与诊疗技术省部共建教育部重点实验室，儿内科，黑龙江省哈尔滨市150086)文章亮点：1多组动物实验证明了心肌细胞移植对改善心脏功能的效果，但移植

2、细胞效率低下却是一个公认的问题。为啜俊波，男，1979年生，减少移植细胞的流失，构建合适的移植载体与细胞共同移植于受体心脏已成为学界的共识。黑龙江省哈尔滨市人，汉族，哈尔滨医科大学附属2选择胶原海绵作为细胞载体，除了因为胶原海绵为人体天然的间质成分，具有良好的组织相容性，天然的二院在读博士，主要从事多孔隙性，合适的降解率及生物安全性等外，更关键的是利用碳化二亚胺法处理可激活其表面富含的羧基，组织工程心肌补片研究。相互交联或与多种生长因子共价结合，在增强了补片自身的机械性能的同时，又能使生长因子与之稳定结合。3实验首次使用碳化二亚胺法将生长因子血管内皮生长因子和

3、碱性成纤维细胞生长因子共价结合于胶原补片通讯作者：康凯，博士后，上，实现两种因子持续、缓慢的释放，同时生长因子的持续作用可使接种于其上的骨髓干细胞增殖加速，分副主任医师，副教授，硕士生导师，哈尔滨医科大化减缓。学附属二院，黑龙江省哈关键词：尔滨市150086生物栩辩：缓释栩料：心驻幸片：瞧管内皮生长因子：碱性或纤维缀跑生长因子：细胞移植：载体：碳诧二亚姣法：生长因子：缓释：趣管形戒；萤家自然科学基金doi：l03969／jissn20954344201452020主题词：【http：／／www．crterorg】狡啄碳化二亚鞍类：随管内皮生长因子类：或纤维缅貔

4、生长因子2基金资助：中图分类号：R318黑龙江省卫生l亍课题资勃项~(2013053)：国家自然科学基金【818o：中国搏士岳科研基金文献标识码：B(2014M551272)：黑龙江名教育牙科磅课题2s4143q文章编号：2095-4344缩略语：(2014)52-08474-06稿件接受：2014-11-18血管内安生长因子：vascularendothefialgrowthfactor．VEGF碱性浅纤维缅魄生长函子}basicfibroblastgrowthfactor,bFGF摘要背景：动物实验证明心肌细胞移植可改善心脏功能，但移植细胞效率较低，为减少

5、移植细胞的流失，构建合适的移植载体与细胞共同移植于受体心脏已成为学界的共识。目的：观察经碳化二亚胺法处理，共价结合生长因子胶原补片上生长因子的释放情况，以及其对人骨髓干细胞增殖与分化的影响。方法：采用碳化二亚胺法将胶原补片激活后，对照组胶原补片直接保存于PBS内，实验组胶原补片继续浸于含有血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的PBS内，使其与生长因子共价结合，检测共价结合于胶ChuaiJun-bo，Studyingfor原补片上生长因子的量；保存后1d、3d、7d、2周、3周、4周，采用ELISA法检测上清液内血管内皮生doctorate，Departme

6、ntof长因子和碱性成纤维细胞生长因子的含量。将0．5xl0的人骨髓间充质干细胞均匀接种于两组补片上，采用CardiovascularSurgery．the苏木精伊红染色计数细胞，MTT法及Bu增殖实验对比补片上的细胞增殖情况；以FlT．PCR法检测两组细SecondA币IialedHospitalof胞内I、III型胶原表达情况，SMA免疫荧光染色对比两组补片上的细胞分化情况。HarbinMedicalUniversity．Key结果与结论：胶原补片上血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的共价结合率分别为42_4％，24．5％。保Laboratoryof

7、MyocardiallschemiaMechanismand存4周内，胶原补片上的血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子均呈现持续、缓慢的释放模式。与单纯胶Treatment(HarbinMedical原补片比较，共价结合生长因子的胶原补片可在体外有效促进人骨髓间充质干细胞的增殖并抑制其分化。University)．MinistryofEducation．Harbin150086，啜俊波．康凯．孙露．辉．蔡俊陈壳功诫宝栋蒋树林．田海李仁科狡啄补片上生长因子释放及对HeilongjiangProvince．China入骨髓干缀跑墙殪与分化的影响中国组织I程研究

8、．2014．18(52)：8474-8