高效液相色谱仪的日常维护及常见故障.pdf

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1、理论前沿2014年第11期高效液相色谱仪的日常维护及常见故障王媚(陕西中医学院药学院，陕西咸阳712046)【摘要】本文介绍了高效液相色谱仪的日常维护和保养，总结了在使用过程中出现的常见故障和解决办法。【关键词】高校液相色谱仪；日常维护；故障【中图分类号】R197．39【文献标识码】A【文章编号】1o07—4244(2o14)11—494—1一、高效液相色谱仪的工作原理脱气，如仍有气泡不断从过滤器冒出，继续将过滤器浸泡于5％硝高效液相色谱仪fHighperformanceliquidchromatograph，简称酸溶液中

2、，如没有气泡不断从过滤器中冒出，说明过滤器内部的HPLC)，由输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和色谱数据霉菌菌团已被硝酸破坏，流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄处理系统五部分组成。待测样品经前处理后，加入进样器，由高压阀，打开泵，流速调至1．0～3．0m]／min，纯水冲洗过滤器1小时左压输液泵将流动相泵人装有填充剂的色谱柱，经柱内进行分离右。即可将过滤器清洗干净。关闭阀，纯甲醇冲洗半小时即可。后，各成分先后进入检测器，再经色谱数据处理系统获得待测样(二)柱压高品的相关数据和色谱图。原因：(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等

3、)沉积于柱内；(2)样品污染二、高效液相色谱仪的日常维护沉积。高效液相色谱仪主要由贮液器，泵，进样器，色谱柱，检测处理：对于第一种情况先用4O～5O℃的纯水，低速正向冲洗器，工作站等几部分组成。因此，日常维护工作即可从这几个主柱子，待柱压逐渐下降后，相应提高流速冲洗，柱压大幅度下降要部件展开。后，用常温纯水冲洗，之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟；对于第二(一)贮液器种情况，由样品的沉积引起污染的C18柱和纯水反向冲洗柱子，1)保持贮液瓶清洁，定期清洗或更换；2)尽量使用色谱级溶然后换成甲醇冲洗，接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗

4、柱子(冲洗时剂和试剂；3)含有缓冲盐和非色谱级的流动相一定要过滤；4)流间的长短由样品污染的情况而定)，再用换成甲醇冲洗，然后用纯动相应现用现配，防止微生物生长和组分改变。水冲洗，最后甲醇冲洗正向冲洗柱子3O分钟以上。(二)泵(三)既无压力指示，又无液体流过泵的密封圈和柱塞杆是最容易磨损的部件，因此在使用过原因：(1原密封垫圈磨损；(2)大量气泡进入泵体。程中要注意：1)仪器使用完毕，需将泵中的缓冲盐冲洗干净，防处理：对于第一种情况，更换密封垫圈；对于第二种情况，在止盐沉积；2)定期清洗泵头，用10％的异丙醇清洗，再用甲醇

5、清泵作用的同时，用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出洗。空气。(三)进样器(四)压力波动大，流量不稳定1)样品进样前要过滤；2)手动进样器，要用液相专用的平头原因：系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有针，而不能用气相色谱用的尖头针代替以免损伤转子；尽量使用异物，使得两者不能密封。原厂原配的进样瓶，以免对自动进样针造成损伤。处理：工作中注意观察流动相的量，保证玻璃过滤头沉入储(四)色谱柱液器瓶底，避免吸入空气，流动相要充分脱气。如为单向阀和阀1)在使用新柱之前，最好用适宜溶剂在低流量下(0．2～座之间夹有异物

6、，拆下单向阀，放人盛有丙酮的烧杯用超声波清0．3mL／min)冲洗30rain，长时间未用的分析柱也要同样处理；2)定洗。期使用强溶剂冲洗柱子；3)使用缓冲盐时，要先用95％水冲洗，(五)出峰不佳，峰分叉再用有机溶剂冲洗；4)卸下保存时，要盖上盖子，避免固定相干原因：(1)色谱柱被污染；(2)柱头填料塌陷。枯；5)使用保护柱；6)避免流动相组成及极性的剧烈变化；7)避处理：对于第一种情况，先用纯水反向冲洗柱子，然后换成免压力脉冲的剧烈变化。甲醇冲洗，接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短(五)检测器由样品污染

7、的情况而定、，再换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，最1)保持检测器清洁，每天与色谱柱一同清洗；2)防止空气进后甲醇冲洗正向冲洗柱子3O分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳，入检测池内；3)检测器灯有一定寿命，不用时不要打开灯，但也则考虑第二种情况。对于第二种情况，拧开柱头，检查柱填料是不能频繁开关灯；4)不要用手直接接触氘灯表面。仪器在使用过否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料)，装入新填料，滴一滴程中，难免会出现一些故障，故障出现后，要善于用逻辑推理的甲醇，填料下陷，再填，用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆方法，逐一排查，寻找问

8、题所在，然后根据故障的类别大小，采取压紧，再填平，滴甲醇，再压紧反复几次，直至装满填平。柱头用相应的解决措施，必要时需请仪器厂商的工程师进行维修服务。甲醇冲洗干净，擦净柱外壁的填料，拧紧柱头，用纯甲醇冲洗30三、高效液相色谱仪常见故障处理分钟以上。Agilent1260高效液相色谱仪是美国安捷伦公司比较