液相色谱仪日常维护及常见故障.ppt

《液相色谱仪日常维护及常见故障.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在PPT专区-天天文库。

1、液相色谱仪日常维护及常见故障分析主讲：王太松1流动相2脱气机（在线）3泵（单元、二元、四元）4进样器（手动、自动）5色谱柱6检测器(VWD/DAD/FLD/RID…)一、液相色谱仪日常维护及注意事项所用溶剂应为HPLC级，水应为二次超纯水；所用溶剂应经过过滤。过滤水应使用水相滤膜，过滤有机相应使用有机相滤膜，不能混用，也不要用错。每一张滤膜只能用一次，不能重复使用。如果没有在线脱气机，所用溶剂应经过超声脱气。水易滋生藻类，避免直接照射，过滤后的水最好使用不要超过两天。如果条件允许可向溶剂中加入0.001-0.0001M的叠氮化钠。注意溶剂的相容性，避免使用不相容的溶剂。避

2、免使用强酸、强碱或有机氯等腐蚀性溶剂。在溶剂瓶中的溶剂过滤头可能会堵塞，必要时小心拿下用强酸（35%硝酸）浸泡1小时，用水冲洗，但不要使用超声处理。1流动相名称乙酸丙酮乙睛苯丁醇四氯化碳氯仿环己烷环戊烷二氯乙烷二氯甲烷二甲基甲酰胺二甲基亚砜二氧六乙酸乙酯乙醇乙醚庚烷正己烷甲醇甲乙酮1-辛烷戊烷1-丙醇三氯乙烷四氢呋喃甲苯乙酸AcetoneAcetonitrileBenzeneCarbonTetChloroformCyclopentaneButylAlcoholCyclohexaneDichloroethaneCHCl22DMFDMSODioxanEthylacetateE

3、thylAlcoholDi-EthyletherHeptaneHexaneMethylAlcoholMEKI-OctanePentaneI-PropylAlcoholDi-PropyletherCH22Cl4THFTolueneTrichloroethaneWaterXylene三氯甲烷水二甲苯2-丙醚ImmiscibleMiscible溶剂的相溶性溶剂信息避免使用下列对不锈钢有腐蚀性的溶剂：卤化物碱金属溶液和相应的酸溶液。高浓度的无机酸例如：硝酸和硫酸。能够形成卤素自由基或酸的氯化试剂及其混合物。含有过氧化物的色谱级醚必须用氧化铝干燥剂。在有机溶剂中的有机酸溶液。含有强

4、络合剂的溶液。四氯化碳和异丙醇或THF混合液。溶剂截止波长溶剂UV截止波长（nm）乙睛190水190环己烷195己烷200甲醇210乙醇210乙醚220二氯甲烷220氯仿240四氯化碳265四氢呋喃280（220）甲苯285所以在使用紫外检测器时，所用波长应至少比所用溶剂的截止波长大20nm以上。在使用紫外检测器时，所用波长与所用溶剂的截止波长接近（或低于截止波长）时，容易产生噪音干扰，从而影响检测结果。生色团和最大吸收波长生色团分子式实例最大吸收波长（nm）羰基（酮）RR‘C=O丙酮271羰基醛RHC=O乙醛293羧基RCOOH醋酸271酰胺RCONH2乙酰胺208次乙

5、基RCH=CHR乙烯193亚次乙基RC=CR乙炔173睛RC=N乙睛<160硝基RNO2硝基甲烷271溶剂、PH、温度等都会影响生色团的最大吸收峰的强度和位置。溶剂过滤不干净的溶剂或在溶剂瓶中长菌的溶剂会阻塞溶剂过滤器，降低泵的操作性能。遵从下列建议可以提高性能，延长溶剂过滤器的寿命：使用无菌溶剂瓶避免溶剂长菌。用滤膜过滤溶剂去除微生物。每两天更换或过滤溶剂。避免溶剂瓶直接日照。向溶剂中加入0.0001-0.001M的叠氮化钠。选择合适的滤膜聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，酸和盐，并无任何可溶物。醋酸纤维滤膜：适用于水基溶剂，不适用于有机溶剂，推荐用于蛋白质和其相关的样品

6、。尼龙66滤膜：适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可用于强酸、70%乙醇、二氯甲烷、不适用于DMF二甲基甲酰胺。再生纤维素滤膜：具有蛋白质吸收低，同样适用于水溶性样品和有机溶剂。注意：1，每张滤膜只能用一次。2，水相和有机相不要搞混。柱塞清洗附件SealWashHPLC使用缓冲溶液Buffer时，由于缓冲盐溶液存在高压盐析现象，析出的细小盐粒会损伤蓝宝石柱塞杆和密封垫，从而造成漏液等故障现象，因而建议选配柱塞清洗附件SealWash。缓冲盐浓度大于0.01mol时，强烈建议选配在线的柱塞清洗附件SealWash。清洗液配置：90%水+10%异丙醇溶液，流速为2-3滴/min

7、。该混合液可抑制菌类生长和降低水的表面张力。清洗液虹吸流出，不能干涸。目的脱气方法：氦气脱气回流加热脱气真空脱气超声脱气排除溶解在流动相中的氧气和氮气2脱气机在线真空脱气机为保证脱气机的良好使用性能，在下述情况下需要用注射器抽洗脱气机管路，每个通道使用不低于30ml的异丙醇。1，新的脱气机或新的管路；2，更换了溶剂，尤其是缓冲盐与有机相之间、两个不相容流动相之间的互换时；3，输液泵关闭了一段时间，或使用挥发性溶剂混合物。4，完成上述操作后，打开清洗阀，用大流量冲洗，5ml/min。12mlSolenoidvalve阻尼器/压力