多抗技术对多种鱼类血清免疫球蛋白的研究.pdf

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1、福建农业学报26(6)：919～924，2011Fu3ianJournalofAgriculturalSciences文章编号：1008—0384(2011)06—919—06多抗技术对多种鱼类血清免疫球蛋白的研究王希龙，龚晖，林能锋，王凡。，刘晓东，林天龙(1．福建省农业科学院生物技术研究所，福建福州350001；2．山东潍坊临朐实验中学，山东潍坊262600；3．福建省水产技术推广总站，福建福州350003)摘要：亲和层析纯化鳜鱼血清免疫球蛋白，制备针对鳜鱼血清免疫球蛋白的兔多克隆抗体，采集常见经济鱼类血清25种，利用优球蛋白法纯化血清，通过间接ELISA

2、的方法筛选与兔抗鳜鱼Ig反应的鱼类血清，结合变性还原条件与非变性非还原条件下的蛋白印迹试验显示：制备的兔抗鳜鱼Ig识别鲈形目中鳜鱼、加州鲈鱼、卵形鲳鳞、尼罗罗非鱼、花鲈、红罗非鱼、青石斑鱼、大黄鱼、黑鲷、斜带髭鲷、美国红鱼，鲽形目中的牙鲆、大菱鲆，触形目中的褐菖鼬血清免疫球蛋白的重链与轻链。而与鲤形目中的5种鱼，鲇形目中的4种鱼，鳗鲡目中的海鳗、欧洲鳗鲡反应条带较为复杂。嗜水气单胞菌外膜蛋白免疫刺激复合物(ISCOMs)免疫尼罗罗非鱼，间接ELISA法检测免疫组血清中的抗体，利用兔抗鳜鱼Ig多克隆抗体作为二抗，结果显示，与对照组相比，免疫组有较高的抗体水平。关

3、键词：鱼类；血清；Ig；多克隆抗体；蛋白印迹中图分类号：S917文献标识码：AAnalysesaVarietyofFishSerumImmunoglobulinbyPolyclonalAntibodyWANGXi—long，GONGHui，LINNeng-feng，WANGfan。，LIUXiao—dong，LINTian-long(1．B0￡已c^，z0Z0gInstitute，FianAcademyofAgriculturalSciences，Fuzhou，Fian350003，China；2．LinquExperimentalMiddleSchoolof

4、ShandongProvince，Linqu，Shandong262600，China；3．FianProvincialAquaticTechnologyExtensionStation，Fuzhou，Fujian350003，China)Abstract：SinipercachuatsiserumIgwaspurifiedbyaffinitychromatographyforpreparedpolyelonalantibodyagainstSinipercachuatsiserumIg．Twenty-fivefishSserawerecollectedand

5、purifiedtheserumIgbyeuglobulinprecipitation．SerumIgcouldreactwithpolyclonalantibodythatagainstSinipercachuatsiserumIgwerescreened．ThepolyclonalantibodycouldrecognizeSinipercachuatsi，Micropterussalmoides，Trachinotusovatus，Oreochromisniloticus，Lateolabaraxjaponicus，Oreochromissp．，Epin

6、ephelusawoara，Pseudosciaenacrocea，Sebastiscusmarmoratus，Sciaenopsocellatus，Sparusmacrocephalus，Scophthatmusmaximus，Paralichthysolivaceus，Sebastiscusmarmoratus，serumIgheavychainandlightchain．ThepolyclonalantibodyreactedwithmanyproteinbandsfrompurifiedserumoffivespeciesCypriniformes，f

7、ourspeciesfishofSiluriformes，purifiedserumofAnguillaanguillaandMuraenesoxcinereus．OreochromisniloticuswereimmunizedintraperitoneaIlywithaeromonashydrophillaZN1outermembraneproteinsimmunestimulatingcomplexes(ISCOM)．TheantibodyintheserumwasdetectedbyELISA，thepolyclonalantibodyagainstS

8、inipercachuatsifrom