野生马齿苋草粉总黄酮的提取及含量测定.doc

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1、野生马齿苋草粉总黄酮的提取及含量测定　　摘要：采用单因素试验和正交试验设计，利用乙醇溶剂浸提结合超声波辅助提取法对盛花期野生马齿苋草粉中总黄酮的优化提取工艺进行了研究，并用分光光度计比色法对提取的总黄酮含量进行了检测。试验结果表明，野生马齿苋草粉中总黄酮的优化提取条件为，乙醇浓度为７０％，提取时间为３０ｍｉｎ，提取温度为７０℃，料液比为１∶３０，得到野生马齿苋草粉中总黄酮含量为５．２８１７％。　　关键词：马齿苋；总黄酮；超声波；乙醇浸提　　中图分类号：Q949.745.6文献标识码：A文章编号：0439－８1

2、1407－1462-03　　　　ＥｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＴｏｔａｌＦｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎＷｉｌｄＰｏｒｔｕｌａｃａｏｌｅｒａｃｅａＭｅａｌ　　　　ＨＵＡＮＧＣｈｕｎ－ｈｏｎｇ，ＹＩＮＷｕ－ｐｉｎｇ，ＨＡＯＸｉａｏ－ｈｕａ　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｓｉｎｇｌｅ－ｆａｃｔｏｒｄｅｓｉｇｎａｎｄｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗｅｒｅｄｅｓｉｇｎｅｄｔｏｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ－ａｓｓｉｓｔｅｄｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｔｏｅｘｔｒａｃｔａ

3、ｎｄｄｅｔｅｃｔｔｈｅｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｗｉｌｄＰｏｒｔｕｌａｃａｏｌｅｒａｃｅａｍｅａｌ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｗａｓ７０％ｅｔｈａｎｏｌ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｆｏｒ３０ｍｉｎ，ｓｏｌｉｄｔｏｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏａｔ１∶３０，ａｎｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｔ７０℃．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｅｘｔｒａｃｔｅｄｔｏｔ

4、ａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍｗｉｌｄＰｏｒｔｕｌａｃａｏｌｅｒａｃｅａｍｅａｌｗａｓ５．２８１７％．　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｐｏｒｔｕｌａｃａｏｌｅｒａｃｅａ；ｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ；ｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　　　　马齿苋是马齿苋科一年生草本植物，也是一种菜药两用的植物，其分布十分广泛。据报道，每　　１００ｇ马齿苋鲜茎叶中约含水分９０．３0ｇ、蛋白质２．３0ｇ、脂肪０．５７ｇ、碳水化合物２．４３ｇ、粗纤维　　２．３８ｇ、灰分２．０２ｇ以及多种维生素［１，２］。这就证实

5、了马齿苋具有较高的营养功能和饲用价值，不仅可以作为人的食物，在动物饲料资源开发利用方面也具有很大潜力。现代研究证实，马齿苋除含有多种营养成分外，还含有一定量的生物碱、黄酮类化合物、强心甙、蒽醌类化合物、苹果酸、柠檬酸、皂甙、鞣质等活性成分。黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类多酚类化合物，多以甙类形式存在，有关黄酮的药理作用的研究报道较多，如黄酮的抗氧化作用和免疫调节等方面的研究。为了探讨马齿苋草粉在动物饲料中的应用前景，尤其是在防止饲料脂质过氧化以及提高动物免疫力等方面的价值，对盛花期野生马齿苋草粉中的总

6、黄酮的提取工艺进行了研究，并对总黄酮的含量进行了测定。　　１材料与方法　　１．１试验材料　　１．１．１试验样品开花期野生马齿苋于２００９年８月采自湖南省常德市周边。将去根、去杂质后的新鲜马齿苋于６５℃烘至恒重，粉碎后过４０目筛，制成分析样，于密封样品袋中保存，待测。　　１．１．２药品与试剂芦丁对照品、石油醚、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠，以上药品与试剂均为分析纯。　　１．１．３仪器设备超声波提取器、紫外可见分光光度计、精密电子天平、恒温水浴锅、干燥箱、索式提取器。　　１．２试验方法　　１．２．１试验设

7、计采用单因素试验设计分别研究4个因素，即乙醇浓度、提取时间、料液比和提取温度对马齿苋总黄酮提取量的影响。具体研究方案为不同乙醇浓度，最佳乙醇浓度＋超声波提取时间，最佳乙醇浓度＋最佳超声波提取时间＋料液比，最佳乙醇浓度＋最佳超声波提取时间＋最佳料液比＋提取温度。在单因素试验的基础上，采用正交选择试验将料液比、乙醇浓度、提取温度、提取时间共四因素各三水平，选用Ｌ９正交表对马齿苋总黄酮的最佳提取条件及提取量进行研究。　　１．２．２总黄酮的提取方法称取待测样品→索氏提取法脱脂→精密称取１ｇ脱脂样品于５０ｍＬ锥形瓶中→

8、加入一定体积的乙醇溶液→超声波辅助提取兼水浴加热提取一定时间→趁热过滤→用相应体积浓度的乙醇定容至１００ｍＬ，摇匀，制得马齿苋总黄酮提取液，待测。　　１．２．３芦丁标准曲线的绘制精密称取芦丁对照品５０ｍｇ，用体积分数７０％的乙醇溶解，定容至　　５０ｍＬ容量瓶中摇匀。得到１ｍｇ／ｍＬ芦丁标准贮备液。精密移取１ｍｇ／ｍＬ芦丁标准贮备液８ｍＬ于１０ｍＬ容量瓶中，用去离子水定容，得到０．８ｍｇ／ｍＬ芦丁标准