一株具有抗菌活性红树林土壤放线菌的分离和鉴定.doc

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1、一株具有抗菌活性红树林土壤放线菌的分离和鉴定　　摘要：分离和鉴定具有抗菌活性的红树林土壤放线菌。基于形态特征、生理生化特性和１６ＳｒＤＮＡ序列分析，研究通过稀释分离法从广西北海红树林的高盐泥样中分离到１株细菌。系统进化分析表明，分离菌株与链霉菌属ＡｕｒａｎｔｉｏｇｒｉｓｅｕｓＡＹ９９９７７３具有９９％的同源性，因此，ＢＨ０９５１初步被鉴定为链霉菌属ＡｕｒａｎｔｉｏｇｒｉｓｅｕｓＡＹ９９９７７３的变种。说明放线菌ＢＨ０９５１具有抗菌活性，本研究能为本菌株乃至广西北海红树林的微生物资源的开发和利用提供初步数据。　　关键词：放线菌；链霉菌属；抗菌活性；１６ＳｒＤＮＡ；系统发育分析　　中

2、图分类号：Ｓ１５４．３８＋４，Ｑ９３９．１３文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11404－0734-03　　　　ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆMａｎｇｒｏｖｅｓｏｉｌＡｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓｗｉｔｈAｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌAｃｔｉｖｉｔｙ　　　　ＨＵＡＮＧＤａ－ｌｉｎ，ＹＵＡＮＧｕｉ－ｆｅｎｇ，ＸＵＹａ－ｊｕａｎ，ＬＵＯＮａｉ－ｘｉａｎｇ，ＣＨＥＮＪｉａｎ－ｈｏｎｇ，ＬＩＵＪｉｎｇ，　　ＪＩＡＮＧＬｉａｎ－ｘｉｕ，ＣＨＥＮＳｅｎ－ｚｈｏｕ　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＡｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ

3、ｓｐ.ｏｆｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｆｒｏｍｍａｎｇｒｏｖｅｓｏｉｌwereproceeded．Ｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ，ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄ１６ＳｒＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅｈｏｍｏｌｏｇｙａｎａｌｙｓｉｓ，ａｎｉｓｏｌａｔｅｄｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｒｏｍｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｏｆｓａｌｔ－ｈｉｇｈｓｏｉｌｆｒｏｍＢｅｉｈａｉｍａｎｇｒｏｖｅｆｏｒｅｓｔｗａｓｉｄｅｎｔｉｆｅｄ．Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｓｔｒａｉｎｂａｓ

4、ｅｄｏｎｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆ１６ＳｒＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔｉｔｗａｓｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓａｕｒａｎｔｉｏｇｒｉｓｅｕｓＡＹ９９９７７３ｗｉｔｈ９９％ｉｄｅｎｔｉｔｙ．Ｓｏ，tｈｅｉｓｏｌａｔｅｄｓｔｒａｉｎｗａｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓｏｎｅvarietyｏｆＳ．ａｕｒａｎｔｉｏｇｒｉｓｅｕｓＡＹ９９９７７３．ＩｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＡｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓｓｐ．ＢＨ０９５１ｗａｓｏｆａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙ．Ａｎｄｔｈｕｓitｗｏｕｌｄｐｒｏｖｉｄｅｔｈｅｏｒｉｇｉｎａｌｄａｔａｆｏｒｄｅｖｅｌｏｐ

5、ｔｉｎｇａｎｄｅｘｐｌｏｉｔｔｉｎｇｔｈｅｓｔｒａｉｎｏｆＢＨ０９５１ａｎｄｔｈｅｏｔｈｅｒaｃｔｉｎｏｍｙｃｅteｓｒｅｓｏｕｒｃｅｓｏｆｔｈｅｍａｎｇｒｏｖｅｆｏｒｅｓｔｓｏｉｌｏｆＧｕａｎｇｘｉＢｅｉｈａｉ．　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：aｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ；Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ；aｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙ；１６ＳｒＤＮＡ；pｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓ　　　　自抗生素发现以来，微生物来源的药物随着人们的需求在不断地增加，近年来海洋微生物资源研究成为科学界关注的热点领域之一。海洋环境属于地球上最大的盐环境，由于其环境的多样性，使得海洋微生物具有其特

6、殊的生理机制和独特的基因类型，具有产生新的生物活性物质的巨大潜力，因而向海洋微生物寻求药用物质和药物先导化合物成为各国的重点研究方向［１-３］。广西拥有丰富的红树林资源，红树林是自然分布于热带、亚热带海岸潮间带的木本植物群落，生存环境处于海洋向陆地的过渡带，有着不同于陆地的性质，水分高、盐分高、氧气缺乏。其地下部分的微生物较之其他生态系统有很大的差异，这就赋予了红树林土壤微生物产生活性物质的潜在可能性。２００９年７月，从广西北海红树林根部泥样中分离得到一株放线菌ＢＨ０９５１，其发酵产物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌等病原微生物有很强的抗菌活性，具有从中开发微生物药物的潜力。

7、通过对其１６ＳｒＤＮＡ序列分析，结合形态特征、培养特征、生理生化特性等多相分类研究，初步确定了该菌株的分类地位。现将研究结果报道如下。　　１材料　　菌种分离自广西北海红树林根部土壤海泥标本，用海水配制高氏１号琼脂，采用稀释分离法将所采集的样本进行分离纯化，经筛选共获得放线菌菌株２５６株。对其进行初步抑菌活性测定，得到１株具有很好开发潜力的菌株，菌株分离及筛选方法参见文献［４］、［５］、［６］、［７］。抗菌活性测定所用指示菌由本实验室保藏。　　高氏１号培养基。抗生素药敏纸片、培养皿