沉默Survivin基因对鼻咽癌CNE1细胞增殖和凋亡的研究.pdf

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1、74现代检验医学杂志第29卷第6期2014年11月JModLabMed，Vo1．29，N。．6，Nove．2014沉默Survivin基因对鼻咽癌CNE1细胞增殖和凋亡的研究王玉明，马小兰(泰州市中医院检验科，江苏泰州225300)摘要：目的探讨Survivin表达降低时，对鼻咽癌细胞的增殖及凋亡的影响。方法运用RNA干扰技术，结合RT-PCR，Westernblot技术，观察干扰Survivin效果。干扰Survivn后用MTT法和TUNEL法检测鼻咽癌细胞增殖，凋亡的情况。用Western-blot方法检测凋亡相关蛋白P

2、ARP，Bcl一2和Bax的表达。结果RT—PCR检测显示SurvivinsiRNA干扰组，SurvivinmRNA表达明显下调，其相对表达量为0．26±0．02，抑制率为43．7，与对照组相比差异具有统计学意义(Pd0．05)；Westernblot检测显示Survivin-siRNA组蛋白表达下调，其蛋白相对表达量下降了57，与对照组相比差异具有统计学意义(P

3、具有统计学意义(P<0．05)；Tunel染色结果显示Survivin-siRNA组细胞凋亡数明显增高。Westernblot结果显示SurviviwsiRNA组凋亡蛋白PARP(89KD)显著升高，为对照组的3．9倍，抑制凋亡蛋白Bcl一2降低，降低了7O，促进凋亡蛋白Bax升高，为对照组的2．4倍；同时也抑制AKT的磷酸化，磷酸化水平降低了57，与对照组相比以上结果差异均具有统计学意义(P<0．05)。结论干扰Survivin表达，抑制鼻咽癌细胞增殖，促进细胞凋亡Survivin基因可成为鼻咽癌基因治疗的一个潜在靶点关键

4、词：Survivin；鼻咽癌细胞；RNA干扰；增殖；凋亡中图分类号：R739．63；R730．43文献标志码：A文章编号：1671-7414(2014)06—074—05doi：lO．3969／J．issn．1671-7414．2014．O6．O24ResearchontheEffectofSilenceofSurvivinGenebyRNAiontheProliferationandApoptosis0fNas0pharyngealCarcinomaCNE1CellsWANGYu—ming，MAXiao—lan(Depar

5、tmentofClinicalLaboratory，TaizhouHospitalofChineseMedicine，JiangsuTaizhou225300，China)Abstract：ObjectiveToexploretheeffectofdecreaseofSurvivinexpressionontheproliferationandapoptosisofthenasopharyngealcarcinomacells．MethodsToobservetheeffectofdecreaseofSurvivinexpr

6、essiononnasopharyngealcarcinomacellmorphologyusingRNAitechnologycombinedwithRT—PCRandWesternblot．Cellproliferationandapoptosiswerede—tectedbyMTTandTUNELassay．TheexpressionofPARP，Bcl-2andBaxwasdetectedbyWesternblot．ResultsRT—PCRresultshowedthesurvivinmRNAexpressioni

7、nSurviving—siRNAgroupswasdownregulated(about0．26±0．02)andtheinhibitionratiowas43．7(P

8、tresultshowedtheSurvivinproteinexpressioninSurvivin—-siRNA2groupswasdownregalatedandtherelativeex—pressionlevelwasreducedby57(P<0．05)．TUNELassays