超滤提高克拉维酸发酵滤液质量的研究.pdf

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1、广东化工2015年第5期28www．gdchem．com第42卷总第295期超滤提高克拉维酸发酵滤液质量的研究唐云峰，张晓晓，靳孝庆，曹广祥l，2(1．鲁南制药集团股份有限公司国家手性制药工程技术研究中心，山东临沂276006：2．山东省医药生物技术研究中心，山东济南250062)StudyOnImprovementOfClavulanicAcidFermentationFiltratebvUItrafiltrationTangYunfeng，ZhangXiaoxiao，JinXiaoqing’，C

2、aoGuangxiang’’(1．NationalEngineeringResearchCenterofChiraldrugs，LunanPharmaceuticalGroupCorporation，Lin’yi，Shandong，276006：2．ShandongMedicinalBiotechnologyCentre，Ji’nan，Shandong，250062)Abstract：Thepaperstudiedtheeffectofultrafiltrationmembranesofdifere

3、ntmolecularweightcut．offonclavulanicacidfermentationfiltratequality，andthe10kDaultrafiltrationmembranewasthebestSomeparameterswereoptimized，suchastemperature，pressure，additionalwateramount．Theresul~showedthattheoptimumconditionwasasfoIlows：filtertemper

4、aturewas10℃，inletpressureWas0．7Mpa，outletpressurewas0．3Mpa，anddiferentialpressurewas0．4Mpaadditionalwateramountwas0．5timesoffermentationfiltrateamount．TheproteinandpigmentcontentofClavulanicacidfermentationfiltratedecreasedsignificantlyafterultrafiltra

5、tion，andthequalityofthefiltrateimprovedsignificantly，whichwasbeneficialforthesubsequentextractionprocessKeywords：ultrafiltration：clavulanicacid；solubleprotein：pigment克拉维酸是StreptomycesClavuligerus(棒状链霉菌)产生的天分别加入不同体积的浓度为100~g／mL牛血清清蛋白标准液，补然p．内酰胺酶抑制剂，能够不可

6、逆结合B．内酰胺酶的丝氨酸活性充水到1．0mL。然后每只试管加入5．0mL考马斯亮蓝G．250试剂，位点而保护B．内酰胺类抗生素的活性I】l。临床上克拉维酸常与B。摇匀放置5min，在紫外一可见分光光度计595nm处测定吸光值。内酰胺类抗生素复配使用，能够有效增强B．内酰胺类抗生素的抗以A595吸光值为纵坐标，牛血清清蛋白的数量为横坐标绘制菌活性并扩大抗菌谱，其中以阿莫西林／克拉维酸钾复方制剂的应标准曲线。用最为广泛，曾连续l3年位列世界畅销药排行榜【2】。将样品稀释至可溶性蛋白浓度约100g^nL

7、，按照上述方法克拉维酸一般采用发酵法生产，之后通过一定的技术手段得进行测定。可溶性蛋白去除率采用如下计算公式：可溶性蛋白去到发酵滤液，然后采用溶剂萃取等方法进行进一步的分离纯化，除率=(超滤前的可溶性蛋白含量一超滤后的可溶性蛋白含最)／超进而得到克拉维酸钾成品【jl。作为关键步骤之一，发酵滤液的质滤前的可溶性蛋白含量。量对整个工艺过程和最终产品质量有至关重要的影响。获得发酵l_3-2色素去除率的测定滤液的常用技术手段有板框过滤、离心机过滤、真空转鼓过滤等，克拉维酸的发酵液的色素一般采用350nln波

8、长下的吸收值这些方法获得的发酵滤液通常含有大量的可溶性蛋白、色素等杂(Asomn)表示，色素去除率采用如下计算公式：色素去除率=(超滤质，澄清度不高，在后续的萃取过程中存在严重的乳化现象，从前的A35超滤后的A3‰m】／超滤前的A3sm。而影响产品质量和收率】。膜技术是一种新型分离技术，具有高1．3．3克拉维酸的测定效节能、滤液质量高、过程简单、无相变、可在常温下连续操作将样品用水稀释至每lmL中含克拉维酸约O．25mg。采用等优点，已经广泛应用于医药工业中，以不锈钢