靶向VEGFR－3载阿霉素脂质微泡超声造影剂体外显影及寻靶能力的实验研究.pdf

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1、中国l临床医学影像杂志2015年第26卷第7期JChinClinMedImaging，2015，Vo1．26，No．7·509·靶向VEGFR一3载阿霉素脂质微泡超声造影剂体外显影及寻靶能力的实验研究叶呜，王志刚，周鸿，牛诚诚，陈昶宇，刘莹(1．成都市第三人民医院一重庆医科大学附属成都第二临床学院，四川成都610010；2．重庆医科大学超声影像研究所，重庆400010；3．中南大学湘雅二院超声科，湖南长沙410000)【摘要】目的：制备一种靶向淋巴管内皮细胞载阿霉素脂质微泡超声造影剂，并考察其体外显影及寻靶能力

2、。方法：制备生物素化抗VEGFR一3单克隆抗体，检测其生物素化程度；用机械振荡法．及生物素一亲和素桥连方式构建靶向VEGFR一3载阿霉素的脂质超声微泡。检测其一般特性；行体外超声，观察其显影效果；并在荧光下观察靶向载药微泡在体外与细胞的结合能力，与载药非靶向微泡做比较。结果：每个单抗分子平均可与9个生物素分子结合，所制备的载药靶向脂质微泡超声造影剂分散度佳，其平均粒径为1．66m；体外超声显影，载药靶向脂质微泡呈高回声，回声强度随浓度及机械指数减小而降低；体外寻靶试验显示，该靶向载药脂质微泡较多并牢固的聚集在淋

3、巴管内皮细胞表面。结论：成功制备的靶向VEGFR一3载阿霉素脂质微泡超声造影剂，有较高的包封率及载药率，其在体外有增强超声显影效果，并对淋巴管内皮细胞亲和力有较强的特异性。【关键词】内皮细胞；血管内皮生长因子受体3；淋巴管；造影剂【中图分类号】R445．1[文献标识码】A【文章编号】1008—1062(2015)07—0509—03ExperimentalstudyonenhancementeffectandtargetingstudyinvitroofVEGFR-3-targetedlipidmicrobub

4、bleultrasoundcontrastagentscontainingadriamycinYEMingWANGZhi一)∞季，ZHOUHongsNIUCheng-chengCHENChang-yu1,LIUYingfj．DepartmentofUltrasound,theThirdPeopleSHaspitalofChengdu．Chengdu610010,China,"2．InstituteofUltrasoundImaging,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing40

5、0010，China；3．DepartmentofUltrasound,XiangyaNo．2Haspital，Changsha410000,China)Abstrast：Objective：ToprepareVEGFR-3-targetedlipidmicrobubbleultrasoundcontrastagentscontainingadriamycin，andinvestigatetheirenhancementeffectandafinityonhumanlymphaticendothelialcel

6、lsinvitro．Methods：ThebiotinylateddegreeofpreparedbiotinylatedmonoelonalantibodyVEGFR一3wasdetermined．Themicrobubblescontainingadriamycinwerepreparedbymechanicalvibration．Thenthebiotinylatedantibodywasattachedtothesurfaceofthemicrobubblesbyavidin——biotinintera

7、ction．Thephysicalprope~ywasdeterminedandtheenhancementeffectinvitrowasobservedwithultrasound，Theconjugationoftargetedlipidmicrobubbleultrasoundcontrastagentscontainingadriamycinwithhumanlymphaticendothe—lialcellswasprovedbylightmicroscopeandfluorescencemicro

8、scope，withnon-targetedmicrobubblesservedascontrolgroup．Results：About9biotinmoleculeswerecoupledtoeachantibodyinaverage．Thedispositionofthepreparedmicrobubbleswasuniformsize，themeandiameterwas1．6