PCR技术在医学检验乙肝中的应用-论文.pdf

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1、·2576·齐齐哈尔医学院学报2014年第35卷第17期JournalofOiqiharUniversityofMedicine，2014，Vo1．35，No．17．经验交流．PCR技术在医学检验乙肝中的应用杨巍巍【摘要】目的研究PCR在医学检验中的应用。方法随机抽取50例患者2013年6月进入我院进行调查，所有患者均为乙肝携带者，需要进行采、化验等检验患者的病况。将患者随机分为实验组和对照组，实验组人数30人，对照组人数20人，实验组采用PCR技术对患者进行检测，对照组采取常规的方法对患者进行检测。两组的用药量与种类严格的一致。分别记录这两组实验对乙肝患者检测出的病

2、毒数量并探其性。结果观察组检测乙肝患者病毒的速度和准确性明显高于传统检测方式的效果，经过记录显示最后的统计学结果，P<0．05，表明测试结果具有统计学意义。结论通过PCR技术对乙肝患者的检测实验结果更准确快速，所以PCR技术检验明显优于传统的检验方式。【关键词】聚合酶链式反应；检验；乙肝聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction)，简称表1两组患者检测灵敏程度比较表PCR_1J，是一种分子生物学技术，用于放大扩增特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。我科近年来采用PCR技术对乙肝患者的血清资料进行检测分析，为比较PCR与传统检测方法的差

3、异，特与采用传统检测手段患者资料进行对照分析，现综合报道如下。一表中的数据显示P值小于0．05，表示调查结果具有统计、资料与方法1．一般资料：随机抽取于2013年6月在我院乙肝治疗的学意义，即表明PCR技术对乙肝的检测优于传统学检测。50例患者，年龄分布为20—60岁。调查的5O例患者均为乙讨论PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏肝患者，全身均无系统性疾病和药物过敏史。患者需要进行95。高温时变性会变成单链，低温(经常是60℃左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶采血、化验等辅助检查。现将50例患者随机分为实验组和对照组，实验组人

4、数30人，男12人、女18人，对照组人数20最适反应温度(72℃左右)，DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5人，男11人、女9人。分组完全按照随机分组的方法来进行一3，的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就分组，两组患者在年龄、性别及疾病原因等方面比较，差异不是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很显著，不具有统计学意义，具有可比性。好地进行控制。医学检验是对病人的血液、体液、分泌物或脱2．纳入和评价标准：纳入标准：年龄在20～60岁的乙肝落细胞等标本，进行化验检查，以获得病原、病理变化及脏器患者；没有免疫缺陷等疾病、智力正常、自然状况一切正功能状

5、态等资料。通过对患者的上述标本进行医学检验，达常；排除标准：存在感觉功能缺陷；先天性的疾病；高血压到对患者疾病进行诊断与辅助诊断的目的。等。ELISA测定的是乙肝病毒表达的蛋白质(多肽)抗原或相3．方法：实验组采取PCR检测技术，对照组采取传统检应的抗体。r'Q．PCR测定乙肝病毒DNA。检测HBV—DNA是验方法，即常规的物化检测。两组的用药方法用量相同，均采判断乙肝病毒有无复制的“金指标”。ELISA方法测定乙肝五用局部浸润方法注射。对照组：常规检测技术；实验组：采用项指标依然是辅助诊断乙肝的常规方法，特别对急性乙肝的PCR技术，根据对乙肝患者抗原抗体检测的敏感度

6、进行评价。发现有重要作用，只是该方法对检测慢性乙肝表现得越来越4．效果评价标准：观察检测抗原抗体的数量和灵敏度不灵敏，特别是在乙肝病毒发生了变异以后，需要进行HBV-作为评估标准。DNA检测才能确诊。在技术上，FQ—PCR采用荧光标记和闭5．统计学处理：采集到的数据采用SPSS15．0软件进行管检测，克服了常规PCR扩增产物污染所致假阳性的缺点，统计学分析，百分率(％)表示计数资料，定性资料的比较采使结果具有极高的特异性和敏感性。但在分析FQ—PCR结果用x检验，成组设计的t检验用于组间比较，当P<0．05时，时，还应考虑以下因素：r'Q．PCR的反应体系复杂，易受多

7、种可认为差异有统计学意义。因素影响。待测标本的溶血、脂血、处理不当都会导致其假阳二、结果性或假阴性；VQ．PCR只能检测血中游离的HBV—DNA，当病两组的检测效果统计情况见表1。毒整合到肝细胞染色体上，随同肝细胞一起复制、表达时，ELISA可出现阳性反应，但血清中已没有HBV颗粒存在，作者单位：163453黑龙江省大庆龙南医院检验科此时FQ．PCR为阴性反应；当患者感染的HBV—DNA发生突变，不能与荧光探针结合，r'Q—PCR为阴性，而ELISA可为阳齐齐哈尔医学院学报2014年第35卷第17期JournalofOiqiharUniversity