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《原钙黏蛋白-20在肺癌组织中表达及其机制-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华实验外科杂志2014年9月第31卷第9期ChinJExpSurg,September2014,Vo1.31,No.9·临床研究·原钙黏蛋白.20在肺癌组织中表达及其机制卓毅冯茂辉【摘要】目的探讨原钙黏蛋白-20(PCDH20)的表达与其启动子区甲基化水平的关系以及PCDH20基因在肺癌发生、发展中的作用及相关的作用机制。方法采用半定量逆转录一聚合酶链反应(SqRT—PCR)检测PCDH20在15例正常成人肺组织和20例肺癌组织的表达;用甲基化特异性PCR(MSP)检测20例肺癌组织中PCDH20启动子区的甲基化水平。结果PCDH20在几乎所有正常组织中表达,在95%的肺癌组织中不表达
2、(19/20)。80%的肺癌组织中存在PCDH20启动子的甲基化,而在正常肺组织中未检测到。结论DNA甲基化是PCDH20在肺癌中表达下调或缺失的原因之一,PCDH20在大肠癌的发生发展中起抑制作用。【关键词】肺癌;原钙黏蛋白-20Expressionandpotentialmechanismofprotocadherins10inlungcancertissuesZhuoYi,FengMaohui.DepartmentofThoracicSurgery.f^eFirstAffiliatedHospitalofFujianMedicalUniversity.Fuzhou35ooo5.Ch
3、ina【Abstract】objectiveToexplorethefunctionandpotentialmechanismofprotocadherin20(PCDH20)geneinlungcancerdevelopment.MethodsExpressionofPCDH20wasdetectedin15casesofnormaladulttissuesand20casesof1ungcancerbysemi.quantitativereversetranscription—polymerasechainreaction(SqRT—PCR).andthelevelofPCDH20p
4、romotermethylationinlungcancerandnormaltis—sueswasevaluatedbymethylation—specificPCRfMSP1.ResultsPCDH20wasexpressedinallnormala—duhtissuesbutloworsilencedin95%(19/20lungcancertissue.MethylationoftheCpG—richpromoterregionofPCDH20wasdetectedin80%(12/15)lungtumors,whichwassignificantlydifferentfromt
5、hestatusinnormallungtissues(P<0.O1).ConclusionTheseresultssuggestthatepigeneticsilencingofPCDH20iScommoninlungcancer.andPCDH20actsasatumorsuppressorinthecarcinogenesis.【Keywords】Lungcancer;Protocadherins20原钙黏蛋白.20(PCDH20)是protocadherin家族的链反应(RT.PCR)及Westernblot检测。Trizol试剂盒成员,它的编码基因定位于13q21染色体¨。J。
6、既往有购自上海生工生物工程技术服务有限公司,PCR扩增报道PCDH.PC在前列腺癌组织中表达下调或缺失与仪GeneAmpPCRSystem9700。其启动子区的甲基化水平相关,而且能够抑制前列腺2.Westernblot检测黑皮质素4受体(MC4R)蛋白癌细胞的生长。然而,PCDH20在肺癌发生、发展表达:取组织加裂解液,匀浆,1600r/min离心20min,中的作用及相关的细胞内信号转导目前尚不明确。本取上清液,测蛋白浓度。(1)提取总RNA的组织,加研究旨在探讨PCDH20在肺癌患者组织中表达及其机入氯仿离心后,取中下层混合物;(2)加入0.3ml无水制。乙醇,混匀,室温放置3mi
7、n,4cc离心,2000g,5min;(3)取上清(分2个EP,每个4001),加入异丙醇材料与方法1.5ml沉淀蛋白质,室温放10min,4℃离心,12000g,1.一般资料:选取福建医科大学附属第一医院10min,弃上清;(4)用含0.3mg盐酸胍的95%乙醇洗2012年7月至2014年4月手术切除的20例肺癌组织涤蛋白沉淀,每个EP管1ml(1mlTfizol12ml洗涤)及其相应癌旁正常组织标本15例,其中男11例,女9室温
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