CMIA法与ELISA法测定乙型肝炎标志物的比较分析-论文.pdf

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1、2013年9月第11卷第25期·临床研究·213CMIA法与ELISA法测定乙型肝炎标志物的比较分析陈清林(泉州市第一医院检验科，福建泉州362000)【摘要】目的探讨化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)及酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定乙型肝炎标志物的比较分析。方法采用CMIA及ELISA2种方法及相应仪器分别检测300份临床血清，比较分析血清中乙型肝炎标志物的水平，对结果进行统计分析。结果ELISA与CMIA法两种方法对0．1lU／ml以下的HbsAg均具有检出效果；HbsAg、HbsAb、HBeAg、HBeAb

2、、HBcAb的检测相互符合率有差异。结论ELISA法检测乙型肝炎特殊模式的自动化程度较CMIA法差，CMIA法可动态观察HBsAg和HbsAb的变化，对病情进行有效监测。【关键词】乙型肝炎；乙肝病毒标志物；CMIA；ELISA中图分类号：R512．6+2文献标识码：B文章编号：1671-8194(2013)25-0213-02乙型肝炎病毒(HBV)感染在我国已经流行多年，其中乙肝病毒度，HBeAg、HBcAbRLU与临界值RLU的比值超过1时显示为阳性，表面抗原(HBsAg)的携带者约占乙型肝炎(以下简称乙肝)患者的HB

3、eAbRLU与临界值RLU的比值≤1时显示为阳性。十分之一。乙肝的实验室检测对诊断，治疗有重要参考价值【l】，目前国1．4统计学处理内医院检验科检测血清乙肝两对半大多数采用ELISA的方法，当临床采用SPSS13．0软件进行数据分析，数据采用均数±标准差表示。出现HBsAg低浓度标本时，检测方法的敏感度尤为重要，由于影响检组间比较采用t检验，两组间的相关性采用直线相关分析，P<0．05为测结果的因素众多，浓度处于灰区附近的标本检测结果差异性大，临差异有统计学意义。床重复性差。随着检验技术的不断发展，CM1分析法以高灵敏度

4、攻克2结果了HbsAg低浓度不易被检测的问题。本文将ELISA、CMI两种方法进2．1ELISA与CMIA法：两种方法对0．1lU／m!以下的HbsAg均具有检出行比较，现报道如下。效果，具体如表1。表12种检测方法敏感度的比较1资料与方法i．1一般资料本院2009年1月至2012年3月300例体检者，其中男性192例，女性108例，年龄37～55岁，平均(38±3．9)岁。研究对象空腹，无菌情况下用无肝素真空采血管采集肘静脉血5mL，l小时内，用3000r／min2．2ELISA与CMIA法检测时，HBsAg、HBsA

5、b、HBeAg、HBeAb转速离,t~'10rain，分离并吸取上层血清，溶血样本弃用，即刻检测或四项标志物的检出符合率均高于95％，而HBcAb的检出符合率仅有412保存3天内检测。检测前样本恢复至室温，不可反复复温。ELISA87．3％。具体如表2。法测定乙肝“两对半”试剂盒由广州达安基因股份有限公司提供，酶表2ELISA与CMIA法检测乙肝标志物的结果(n=300)标仪、洗板机由上海沪峰生物科技有限公司提供。CMI采用美国雅培全自动酶免分析仪ARCHI-TECT-i2000及相应配套试剂产品。同时将本省临床检验中心

6、提供的临界值控制品作为质控标准。操作方法严格按照试剂盒说明书操作。1．2检测方法1．2．1Elisa~2．3两种方法精密度比较根据说明书进行上样、孵育、洗涤、加酶标抗体、显色、数据读ELISA法批内3％～5％，批间5％～10％，而CMIA法批内<3％，取、统计分析。在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则批间<5％。410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔0D值，若大于规定的阴性对3讨论照OD值的2．1倍，即为阳性。ELISA检测法是目前国内各血液检查最常用的方法之一，根据结1．2．2CMIA法合在固相载

7、体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗本研究CMIA法采用仪器全自动检测，事先设置标本的位置、检原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检测内容，仪器自动检测读取数据，根据数据进行统计分析。标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反1．3结果判读应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的将本省临床检验中心提供的临界值控制品稀释成不同浓度的标其他物质分开_4]。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合本，利用2种检测方法进行5次检测。ELISA法在HBsAgOD值

8、与临界在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的OD值的比例超过1时显示为阳性，HBeAb与HbcAbOD值与临界OD比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的值的比例≤1时显示为阳性。HBsAg与HbsAb在CMIA法中采取定量量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定