乙型肝炎肝DNA检测的意义-论文.pdf

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1、244·临床研究·August2014，Vo1．12，No．23圈衄乙型肝炎肝DNA检测的意义吴平平(内蒙古林业总医院，内蒙古牙克石022150)●●【摘要】目的探讨乙型肝炎肝DNA检测对预测和评价治疗效果的作用和意义。方法选取前来进行乙型肝炎病毒检测的门诊惠者85例，采集血清后进行HBV-DNA定量检测。结果ALT值-5HBV-DNA拷贝数无明显相关(P>0．05)，PCR测定可以检测HBV-DNA含量。结论目前应用PCR测定HBV-DNA能更早期、准确和灵敏的反应HBV在体内的复制状况，是判断乙型

2、肝炎病毒有无复制的指标。HBV-DNA阳性表示病毒在复制，定量检测HBV-DNA可用于乙型肝炎的病因诊断，且可量化，作为临床药物，评价乙型肝炎治疗效果及评估病原传染性较为理想。【关键词】聚合酶链反应；乙型肝炎DNA；检测中图分类号：R512．62文献标识码：B文章编号：1671—8194(2014)23—0244—02乙型肝炎是一种严重危害人类健康的世f生传染病，我国是乙型肝中，均设空白、阳性、阴性及峰值对照，每份标本取两孔均值对结果炎高发区。乙肝可通过血液制品或体液传播给其他人，临床的常规检进行计算

3、。测的方法主要是基于免疫学原理的“二对半”检测，而“二对半”检2结果测无法精确反映病毒数量和病情的变化⋯。聚合酶链反应检测技术其灵血清中HBV-DNA的含量。见表1。敏度高，理论上，只要标本中有一个分子的DNA就可以做出诊断。在表1患者血清~gHBV-DNA含量HBV感染的诊断中，在适合的条件下PCR的敏感性为100copies／mL。特异性强，对于一个2O个核酸的引物来说，非特异性配对的概率为1／420l。其PCR可以克服血清学诊断有的交叉反应的缺陷。为了解乙型肝炎病毒组织中HBV-DNA的含量变化

4、，笔者采用定量聚合酶链反应，对乙型肝炎患者进行HBV-DNA含量检测，现报道如下。1对象与方法1．1研究对象：前来本院进行乙型肝炎病毒检测的门诊患者。3讨论1．2研究方法：HBV—DNA定量检测。采用定量聚合酶链反应检测慢乙肝是乙型病毒性肝炎的简称，是以肝脏损害为主的传染病。肝性乙型肝炎患者血清HBV-DNA含罱。在临床疾病的诊断和治疗中，脏是我们身体中最重要的器官之一，通过医学专家对大量临床试验观常常用到聚合酶链反应测定方法，特别是对病毒性肝炎治疗的动态观察研究，随着年龄的增加，乙肝病毒携带者体内的

5、免疫功能从免疫耐察。乙型肝炎病毒是是一种DNA病毒。此病毒颗粒分为包膜与核心两受过度到免疫清除，引起肝细胞的免疫损伤，发生肝炎的临床表现，部分，其中核心部分含有环状双股DNA、DNA聚合酶和核心抗原。部分患者容易发展为慢性肝炎和肝硬化，少数病例可转变为肝癌。HBV基因组又称HBV-DNA，为环状部分双股DNA，分为长的负链L所以此病对人类危害极大。乙型肝炎病毒其传播途径可因输血、注和短的正链S两股。L链有4个开放读码区。分别为S、C、P、x区。S射、创伤及母婴传播等方式感染。临床上常用“二对半”进行检

6、测，区分别编码包膜上的前S1，前s2蛋白和HBsAg，三者合称为大分子蛋其检测对象是由乙肝病毒感染后，存在于体内的乙肝病毒表面抗原、白。C区编码HBeAg和HBcAg。P区编码一个碱性多肽，称为DNA聚表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体五项指标来完成的l。但由于乙合酶(DANP)，具有反转录酶活性。HBV病毒既可引起急性肝炎，型肝炎病毒的变异、感染初期乙型肝炎病毒抗原的表达量很低、个体也可引起慢性肝炎。目前的定量PCR方法分为三类，包括外标方法、免疫力不同导致抗体表达量的差异、以及免疫检测窗口期长等特

7、点，动力学方法和内标共扩增方法】。HBV-DNA检测采用定量聚合酶链反导致“二对半”检测结果与真实感染情况存在一定差异】。而乙肝病应。DNA变性是指双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，双链解离，毒复制是一个相当复杂的过程，在肝功能的检测中可以发现：ALT值形成单链DNA。变性后，单链重新结合，形成双链。第二步退火指模与HBV-DNA的拷贝数之间无明显的相关关系，其与乙型肝炎病毒含板DNA变性后分解，形成二条单链。系统温度降低后，引物退火，与量水平无关。ALT值出现异常时，表明由于乙型肝炎病毒感染造成的

8、互补的DNA模板结合，形成局部双链。PCR可选择性体外扩NDNA片肝细胞破损程度。而PCR测定可以检测HBV-DNA含量，是反映病毒段。以2O个核甙酸左右为宜，太短会出现错配，太长则易形成稳定的复制活动最直接、可靠的指标。集合体。最后是延伸，引物与模板结合后，在DNA多聚酶的作用下，目前应用PcR测定HBV—DNA能更早期、准确和灵敏的反应lqBV从引物的5’端向3’端延伸，合成与模板互补的DNA链。在荧光定量聚在体内的复制状况，是判断乙型肝炎病毒有无复