SOCS3在肝细胞癌组织中的表达及意义-论文.pdf

《SOCS3在肝细胞癌组织中的表达及意义-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、山东医药2014年第54卷第l3期·基础研究·SOCS3在肝细胞癌组织中的表达及意义王红雷(南阳市第二人民医院，河南南阳100853)摘要：目的观察细胞周期蛋白SOCS3在肝细胞癌组织中的表达，并探讨其表达与患者预后的关系。方法分别应用免疫组化法和Westernblot法检测50例肝细胞癌组织、癌旁组织术后病理标本及17例正常肝组织新鲜标本中SOCS3的表达，分析SOCS3表达与肝细胞癌患者临床特征及生存期的关系。结果SOCS3在肝细胞癌组织、癌旁组织中低表达，在正常肝组织中表达较高(P<0．05)；SOCS3同

2、肿瘤分化程度、肿瘤大小有关(P均<0．05)，同AFP水平及有无肝炎无关(P均>0．05)；其阳性表达患者比阴性表达患者生存期较长(P<0．05)。结论SOCS3在肝细胞癌组织中低表达，其表达同病理分化程度、肿瘤大小及患者生存期相关。关键词：癌，肝细胞；细胞因子信号转录抑制因子3；生存期doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2014．13．OO8中图分类号：R735．7文献标志码：A文章编号：1002．266X(2014)13-0022~3肝细胞癌是常见的消化器官恶性肿瘤，其发片浸入枸橼酸盐缓

3、冲液中，水浴煮沸15rain后冷病原因可能与与病毒感染、肝硬化、酒精及黄曲霉毒却；PBS缓冲液冲洗3次后，滴加1：10浓度的山羊素摄人等因素密切相关J。肝细胞癌的发病机制血清室温下孵育20min，切片滴加一抗4℃冰箱中与肿瘤的分子生物学特性密切相关，其中细胞因子过夜；PBS缓冲液冲洗3次后滴加二抗并37℃的恒信号转导方面的研究目前已成为肝癌研究中的热温孵育箱中孵育20rain，PBS缓冲液冲3次滴加sP点3J。细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)是液并37℃恒温箱中孵育20rain。PBS缓冲液冲洗3JAK／

4、STAT信号转导通路中最重要的抑制子，通过次；DAB染色、苏木素液复染、脱水、封片、光镜观负性调节该通路及其下游原癌基因信号转导和转录察。采用Greenspan半定量法对细胞染色强度及着激活因子3(STAT3)的信号转导，阻止细胞的恶性色细胞百分率进行评分。着色程度：基本不着色为转化及凋亡抑制，其激活和表达具有抑制肿瘤生长1分，中等着色为2分，强着色为3分。着色细胞百的作用J。Riehle等研究表明，SOCS3敲除鼠肝分率：不着色，计0分，≤10％为1分，11％～50％为组织癌变速度明显加快。本研究观察了SOCS

5、3在2分，>51％为3分。着色程度得分与着色细胞百肝细胞癌中的表达，并探讨其表达同临床特征及生分率乘积即为阳性系数。阳性系数为0分者为阴性存时间的关系。(一)，1～3分为弱阳性(+)，≥4分者为阳性(十1资料与方法+)。1．1临床资料50例石蜡包埋肝细胞癌及癌旁组1．2．2Westernblot法检测SOCS3的表达取冻存织标本取自本院2008年1月一2013年6月肝癌患肝组织100mg于2mLEP管中，剪碎组织块后加者术后病理检查标本，患者男39例、女11例，年龄400裂解液(含PMSF)匀浆，裂解充分后将裂解

6、(51．62±7．87)岁；17例正常肝组织新鲜标2010年液移至1．5mLEP管内，4℃下12000r／rain离心51月～2013年6月手术切除的肝血管瘤患者，患者rain，提取上清分装于0．5mLEP管内，一20℃保男13例、女4例，年龄(43．55±11．46)岁。全部患存；Bradtbrd法蛋白定量；配置5％浓缩胶和10％分者术前未接受其他治疗。离胶，沸水中蛋白变性10rain，加样、恒压120V电1．2方法泳，80V恒压转膜；用5％的脱脂奶粉室温封闭；加1．2．1免疫组织化学染色法(SP法)检测SOC

7、S3入一抗4℃过夜；TBST液清洗3次后加1：2000稀的表达标本固定、包埋、切片后，65℃烤30min，释的二抗，室温孵育2h，TBST清洗3次；ECL后移依次脱蜡水化，双蒸水冲洗3次；用3％的双氧水浸至暗室曝光、显影清洗、定影。以内参及检测指标得泡15min，0．01mol／L的PBS缓冲液冲洗3次；将切出相对集中的条带为阳性。22山东医药2014年第54卷第l3期1．2．3随访对肝细胞癌患者进行生存时间或无3讨论瘤时间随访，分析SOCS3表达与临床特征、生存期肝细胞癌是原发性肝癌的常见病理类型，其的关系。随

8、访采用电话随访或者复查方式进行。发病原因与病毒感染、肝硬化、酒精及黄曲霉毒1．2．4统计学方法采用SPSS17．0统计软件，计素摄入等因素密切相关。目前对于肝癌发生、发数资料比较采用检验或Fisher确切概率法，生存展机制的研究多集中在癌基因、抑癌基因、黏附分析采用Kaplan—Meier法Log—rank检验。P≤0．05分子、细胞周期蛋白、细胞因子以及相应的信号为差异