慢性乙型肝炎患者不同HBVDNA水平诱导细胞免疫不同及其意义-论文.pdf

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1、37l8实用垦壶1j鳢～鲞第22艮性乙型肝炎患者不同HBVDNA水平诱导细胞免疫不同及其意义华忠顾锡炳汤琴王娟华朱银芳王栋杨小娟徐月琴陆忠华摘要目的：探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者不同血清HBVDNA水平诱导细胞免疫不同及其意义、方法：对189例CHB患者进行滤泡辅助性T淋巴细胞(Tfh)、HBV特异性CTL、非特异性CTL、白细胞介素一21(IL一21)和肝功能的检测．根据HBVDNA水平分为甲组(91倒)和乙组(98例)结果：甲组HBVDNA水平低于乙组(t=27．56，P<0．001)，Tf11高于乙组(t=4．99，P<0．O1)，II一2

2、1高于乙组(t=8．95，P<0．01)，HBV特异性cTL高于乙组(￡=19．9l，P<0．【)1)，非特异性CTL低于乙组(￡=3．27，P<0．01)，AI低于乙组(t=3．92，P<0．01)，TBil低于乙组(t=3，86，P<0．O1)．．结论：CHB患者不同HBVDNA水平诱导Tfh反应不同，HBVDNA水平高者．Tf11水平低，IL一2I水平和HBV特异性CTL水平也低，并启动非特异性CTL，导致肝功能损害加重。基线HBVDNA水平影响抗病毒疗效的机制可能与不同HBVDNA水平引起Tfh反应不同有关、关键词肝炎．乙型。慢性：HBVD

3、NA；滤泡辅助性T淋巴细胞；IL2l：细胞毒性T淋巴细胞慢性乙型肝炎(CHB)患者的抗病毒疗效与基两组性别、年龄、病程比较差异无显著性(P>线HBVDNA水平有关【]，原因不甚清楚。CHB的0．05)。健康对照组30例为健康献血员，男22例抗病毒疗效与机体的特异性细胞免疫功能有关。本(73．33％)，女8例(26．67％)，平均年龄(35．18±研究将189例CHB患者根据HBVDNA水平分为7．01)岁。两组．比较两组的外周血滤泡辅助性T淋巴细胞1．2检测方法(Tfh)、IL．21、HBV特异性CTL、非特异性CTL和肝1．2．1外周血Tfh的检

4、测肝素抗凝的全血100功能．探讨CHB患者不同HBVDNA水平与Tfh、L，加入CXCR5单克隆抗体l0L，4孵育30lL．21和HBV特异性CTL的关系，并探讨不同rain，然后同时加入CD4及CD19单克隆抗体各10HBVDNA水平影响抗病毒疗效的可能机制。tzI；对照管分别加入各色的同型对照单克隆抗体，1对象与方法4oC孵育30min，经溶血、FACS洗涤液洗涤，FACS1．1研究对象189例CHB患者为2011年1月固定液固定，试剂由美国Ebioscience公司和美国至2012年12月无锡地区的患者，诊断符合2010Biolegend公司

5、提供。用流式细胞仪检测。年慢性乙型肝炎防治指南的诊断标准，纳入标1．2．2外周血IL一21的检测采用双抗体夹心准：HBVDNA阳性(HBVDNA>10拷贝／mL)、ELISA，检测仪器为德朗酶标分析仪．试剂盒由美HBeAg阳性、人白细胞抗原(HLA)．A2阳性、ALT≥国ADL公司提供，严格按试剂盒说明书的程序进2×正常值上限、18岁以上的成年人。排除标准：排行操作。除甲型、丙型、丁型、戊型肝炎病毒感染，无自身免1．2．3HBVM和HBVDNA的检测HBVM(HBsAg、疫性疾病史，未用过抗病毒药物和免疫调节剂。将抗一HBs、HBeAg、抗一HBe

6、和抗一HBc)：1235时间分189例CHB患者根据HBVDNA水平分为甲、乙两辨荧光法，上海新波试剂检测，HBVDNA用实时荧组．甲组9l例，HBVDNA水平为10～10拷贝／光定量PCR法，上海科华试剂检测mL，乙组98例，HBVDNA水平10’～10拷贝／InI。1．2．4HLA．A2等位型的鉴定取100L肝素钠甲组中男66例(72．53％)，女25例(27．47％)，平均抗凝新鲜全血，加人检测管和对照管，分别加入年龄(35．05±5．84)岁，平均病程(4．39±1．34)年，HLA．A2一藻红蛋白及同型对照10L，室温避光孵乙组中男71例

7、(72．45％)，女27例(27．55％)，平均育30rain，经溶【f【L处理后用流式细胞仪(Beckman—年龄(35．74±6．02)岁，平均病程(4．27±1．43)年，couher3XI)检测，试剂购自英国Proimmune公司。1．2．5ttBV特异性CTL的检测试管中加入10L藻红蛋白标记的HIJA一肽四聚体和CD8一异硫doi：10．3969／j．issn．1006—5725．2013．22．035氰酸荧光素、CD3一PC5，和HBVcore18—27抗原肽l作者单位：214005汀苏省，无锡市传染病医院肝病科通信作者：顾锡炳E-m

8、ail：gxbI88681@sil1a『¨L，再加入1【)【)L的肝素抗凝血，同时做同型对实用医学杂志2013年第29卷第