原发性肝细胞癌患者肝细胞HBVDNA整合位点的初步探讨-论文.pdf

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1、现代预防医学2014年第41卷第1期ModernPreventiveMedicine，2014，Vo1．41，NO．1·105··实验技术及其应用·原发性肝细胞癌患者肝细胞HBVDNA整合位点的初步探讨王效军·，李涛z，李彩红z1．广东医学院公共卫生学院，广东东莞523808；2．广东医学院基础医学院，广东东莞523808摘要：目的了解原发性肝细胞癌患者肝细胞中乙型肝炎病毒基因的整合状况。方法应用反向聚合酶链反应扩增乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性肝细胞癌(HCC)患者中乙型肝炎病毒X区片段，经回收、克隆后进行测序，BLAST程序进行序列比对确定整合位点。结果l5例

2、HCC标本中有8例检出特异性电泳条带，克隆后得到测序结果，经序列比对发现有2个整合位点。结论HBV基因在原发肝细胞癌患者中存在整合现象，其整合可能对细胞周期和能量转化有一定影响，相应的影响机制尚需进一步研究。关键词：反向聚合酶链反应；肝细胞癌；乙型肝炎病毒；整合中图分类号：R373．2；R735．7文献标志码：A文章编号：1003—8507(2014)01—0105—03PreliminarystudyofhepatitisBvirusDNAintegrationsitesinhepat0ceUularcarcinomasWANGXiao-jan，LITao，LICa

3、i—hang．SchoolofPublicHealth，GuangdongMedicalc0，Dongguan，Guangdong523808，ChinaAbstract：0bjectiveTostudytheintegrationofhepatitisBvirus(HBV)inhepatocellularcarcinomas(HCC)．MethodsInversepolymerasechainreaction(IPCR)wasusedtodetecttheintegrationofhepatitisBvirusDNAinhepatocellularcarci—nom

4、as(HCC)，whichwerepositiveforserumhepatitisBsurfaceantigen(HBsAg)，thenpurified，clonedandsequenced．ThesiteofintegrationwasanalyzedandcomparedbyBLAST．Results8bandswereobtainedbyinversePCRfrom15patientsand2integrationsiteswereidentifiedaftersequencing．ConclusionTherearesomeintegratedsitesby

5、HBVgeneinHCCpa-tients，whichcouldinfluenceonthecellperiodsandenergytransformation，thecorrelativemechanismofintegrationneedstoberesearchedyet．Keywords：Inversepolymerasechainreaction；Hepatocellularcarcinoma；HepatitisBvirus；Integration乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus，HBV)慢性感近年来，高灵敏的聚合酶链反应(polymerase染

6、是慢性肝炎、肝硬化以及原发性肝细胞癌(Hepa—chainreaction，PCR)方法对HCC肝细胞中乙肝病tocellularcarcinoma，HCC)的危险因素，2O世纪80毒DNA进行扩增的报道屡见不鲜，反向聚合酶链反年代，在人类原发性肝癌标本及肝癌细胞株中发现应Inversepolymerasechainreaction，IPCR)技术可乙肝病毒基因可以整合到宿主染色体]，之后HBV以在人类肝细胞瘤系中检测整合的乙肝病毒基因并基因的整合与HCC之间的联系逐渐引起重视。有研区分病毒DNA与肝细胞基因组14]，因此，本文采用究_2分析68例乙肝病毒整合的细胞侧

7、翼序列，发现IPCR技术筛查HBsAg阳性原发性肝细胞癌患者基有l5例整合的基因位点与肝细胞癌的发生相关联，因组中乙型肝炎病毒可能整合的位点或基因，利用认为病毒基因的整合在癌症发生中能够激活正常的生物信息学探讨整合对宿主基因可能产生的影响，细胞通路，而乙型肝炎病毒在宿主肝细胞染色体基阐明HBV整合在原发性肝细胞癌发生机制中的意因组上的整合不是平均分配而是随机的∞]，究竟哪义，现将结果报告如下。些基因或位点的整合能引起正常肝细胞向肝癌细胞1材料与方法的转化具体机制尚不清楚。1．1标本来源根据世界卫生组织规定的肝脏及肝基金项目：东莞市医疗卫生单位科技计划