小鼠血清乙型肝炎病毒前S1抗体间接ELISA检测方法的建立和验证-论文.pdf

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1、国际牛物制品学杂志2013年10月第36卷第5期IntJBiolo~icals，October2013，Vo1．36，No．5·225··论著·小鼠血清乙型肝炎病毒前S1抗体间接ELISA检测方法的建立和验证蒋丽明谭昌耀李炯【摘要】目的建立小鼠血清乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus，HBV)前s1抗体的间接ELISA检测方法。方法以合成的HBV前S1(2l一47位氨基酸)多肽包被酶标板，利用方阵滴定法确定间接ELISA方法的最适工作条件，对该法的精密度、特异性和灵敏度进行验证，并与商品化试剂盒进行比较。结果确定最佳抗原包被浓度为1．0

2、mg／L，血清稀释度为1：10。该方法的特异性、灵敏度和精密度均符合检测要求。本法与商品化前s1抗体检测试剂盒测定结果的符合率为98．0％。结论成功建立了HBV前s1抗体间接ELISA方法，可用于小鼠血清中前s1抗体的检测。【关键词】肝炎病毒，乙型；肝炎表面抗原，乙型；酶联免疫吸附测定DevelopmentandvalidationofanindirectELISAfordetectionofhepatitisBvirusPreS1antibodyinmouseserumJIANGLi—ming，TANChang—yao，LIJiong．Sta

3、teKeyLaboratoryofBiotherapy，WestChinaHospital，SichuanUniversity，Chengdu610041，China；ResearchLaboratoryofBiotechnology，ChengduInstituteofBiologicalProductsCo．，Ltd．，Chengdu610023，ChinaCorrespondingauthor：TANChang—yao，Email：changyao—tan@hotmail．corn；LIJiong，Email：lijionghh@¨．Ut

4、ll，【Abstract】0bjectiveTodevelopanindirectenzyme—linkedimmunosorbentassay(ELISA)fordetectionofhepatitisBvirus(HBV)PreS1antibodyinmouseseillm．MethodsMicrotiterwellswerecoatedwithsynthesizedHBVPreS1polypeptides(21—47aminoacid)andoptimalreactionconditionsweredeterminedbycnss—cro

5、ssserialdilutionanalysis．Validationtestswereperformedtoensurefeasibilityofthedevelopedmethod．Specificity，sensitivityandprecisionofthemethodwerecomparedwiththoseofacommercialkit．ResultsTheoptimalantigenconcentrationforcoatingwas1．0mg／Landthedilutionofserumwas1：10．Thespecifici

6、ty，sensitivity，andprecisionofthemethodwerefeasibleforqualitytestsofvaccines．Theoverallcoincidencerateofresultsbythedevelopedmethodandthecommercialkitwas98．0％in150mousesera．ConclusionTheindirectELISAsuitablefordetectionofHBVPreS1antibodyinmouseserumiswelldevelopedandvalidated

7、．【Keywords】HepatitisBvirus；HepatitisBsurfaceantigens；Enzyme—linkedimmunosorbentassay乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus，HBV)前S1抗期就能诱导相应的抗体产生。抗前s1(21—47an)原位于病毒颗粒表面，与病毒装配和感染密切相抗体参与病毒的清除和中和，具有保护作用，被认关⋯。前s1[21—47位氨基酸(an)]肽段是HBV为是预示乙型肝炎(hepatitisB，HB)患者康复的重特异性结合肝细胞的主要位点引，含有丰富的T、B要标志]。因此，在疫苗中

8、加入前Sl抗原可能会细胞表位，具有良好的免疫原性，在HBV感染早进一步增强其免疫效果。目前，国外已有含前S抗原的HB疫苗上市，临床试验结果显示，其在普