TGF-β1多肽疫苗抗肝纤维化的鉴定-论文.pdf

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1、中华临床医师杂志(电子版)2013年1月第7卷第1期ChinJClinicians(ElectronicEdition)，January1，2013，V01．7，No．1·基础论著·TGF—f31多肽疫苗抗肝纤维化的鉴定翟嵩党双锁李亚萍贾晓黎王媛王秀芳王文俊李梅【摘要】目的鉴定转化生长因子B1(TGF-131)的优势抗原表位偶联钥孔戚血蓝素(KLH)蛋白人工合成多肽疫苗对SD大鼠的免疫原性，并探讨对SD大鼠实验性肝纤维化的抑制效应。方法人工合成TGF一131优势抗原表位多肽偶联KLH蛋白后，作为多肽疫苗免疫sD大鼠。40只SPF级sD大鼠随机分为4组，即正常

2、对照组、佐剂对照组、造模组(CC1诱导)、多肽疫苗组，每组各10只，采用CC1复合因素诱发大鼠肝纤维化模型。多肽疫苗组动物第1、14、28天连续三次每次腹股沟处及腋窝处多点注射5OpLg0．5ml乳剂(相同体积的弗氏佐剂加合成肽)，此后每隔7d免疫一次无任何佐剂的合成肽(50g0．5ml水剂)，共免疫1O周；造模组及多肽疫苗组自第3周起首次皮下注射40％CC1橄榄油溶液2ml／kg，以后每周2次背部皮下注射4

3、D％CC1橄榄油溶液1．5ml／kg、30％乙醇6ml／kg隔日灌胃并给予高脂饮食连续造模8周。正常对照组大鼠同时给予相同剂量的橄榄油溶液皮下注射；佐

4、剂对照组大鼠同期给予注射用水加弗氏佐剂0．5ml乳剂。第10周处死所有大鼠，ELISA检测血清TGF-131抗体、肝纤维化指标(HA、IV-C)，全自动生化仪检测血清ALT、AST、TBIL、ALB和GLB，碱水解法检测肝脏羟脯氨酸(Hyp)含量，并进行肝脏病理检查。结果TGF．131多肽疫苗可以诱导sD大鼠产生一定量的抗TGF一131抗体，但是与对照组比较没有统计学差异(P>0．05)。多肽疫苗组生化指标ALT、AST、TBIL与造模组比较有统计学差异(P<0．05)，但是血清HA、IV—C含量及肝脏Hyp含量与造模组相比并没有统计学差异(P>0．05)。

5、HE、VG染色可见多肽疫苗组较造模组肝组织病理变化及纤维化程度无明显差异。结论TGF-131多肽疫苗可以诱导SD大鼠产生一定量的抗TGF．131中和抗体，且可能具有保肝作用，但其干预治疗实验性大鼠肝纤维化的疗效较差，有待进一步研究。【关键词】转化生长因子131；肝硬化；钥孔戚血蓝素蛋白；多肽疫苗EvaluatingtheimmunogenicityofTGF-阻antigenpeptidecoupled-KLHasanti-hepaticfibrosisvaccineZHAIs0ng，DANGShuang—slid，LIYa-ping，肌Xiao—li，WA

6、NGYuan，WANGXiu-fang，WANGWen-jun，LIMei．DepartmentofInfectiousDisease，TheSecondAffiliatedHospital，SchoolofMedicine，尉anJiaotongUniversity，Xian710004，ChinaCorrespondingauthor：ⅣGShuang—silo．Email：dang212@126．com【Abstract】ObjectiveTolayafoundationforthefurtherdevelopmentofanovelvaccineba

7、sedonTGF-131，apivotaleytokine，leadingtohepaticfibrosis，wedetectedtheneutralizationactivityandevaluatedanti—liverfibrosisactivitybykeyholelimpethemocyanin(KLH)coupledTGF一131domainantigenpeptidevaccine．MethodsPossibleB·-cellepitopeswerepredictedbybioinformaticsandKLH-coupledpeptidesc

8、orrespondingtothe90-98aminoaciddomainofTGF-BlweresynthesizedbytheFMOCmethod．Hepaticinjurymodelratswereinducedbymultiplefactorsincludingcarbontertrachloride(CC14)．Altogether40maleSDratswererandomlydividedintofourgroupscontainingtenratspergroup：Normalgroupwasinoculatedwithdistilledwa

9、terfor10weeks，Adjuvantgrou