延迟给予外源性硫化氢加剧脂多糖引起的大鼠肝细胞损伤-论文.pdf

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1、南通大学学报(医学版)JournalofNantongUniversity(MedicalSciences)2014：34(1·1·延迟给予外源性硫化氢IDIIIII多糖引起的大鼠肝细胞损伤木王艳莎，季英磊z，吴林琳，刘夷嫦，谷振勇(南通大学医学院法医学系，南通226001；苏州大学医学部基础医学与生物科学学院法医学系)[摘要]目的：探讨延迟给予外源性硫化氢(hydr0gensulfide，H2S)对脂多糖(1ip0polysaccharide，LPS)诱导大鼠肝细．胞损伤的影响。方法：培养大鼠肝细胞系BRL细胞

2、，用10wg／mLLPS或不同剂量的H2s供体NariS(50、100、200~mol／L)单独或共同处理BRL细胞12h，共同处理时LPS作用细胞1h后再给予NaHS。锥虫蓝拒染法检测细胞存活率的变化；Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡的变化：蛋白免疫印迹法检测内质网应激(endoplasmicreticulumstress，ERS)~志蛋白GRP78及其凋亡相关蛋白CHOP和casDase一12蛋白表达变化。结果：与溶剂对照组相比，LPS引起BRL细胞存活率明显下降(P<0．01)，细胞凋亡明显增

3、加(P<0．01)，GRP78、CHOP和caspase一12表达上调(P<0．01)；与LPS组相比，延迟给予NariS导致LPS引起的BRL细胞存活率降低fP<0．01)，细胞凋亡率增11(P<0．叭1，GRP78、CHOP和caspase一12蛋白表达上调0．05或P<0．01)，NariS的效应具有量效关系；NariS单独作用对BRL细胞无明显影响。结论：延迟给予外源性H，S可加重LPS诱导的大鼠肝细胞损伤．机制与上调ERS有关。『关键词1外源性硫化氢；脂多糖；肝细胞；内质网应激；大鼠【中Itt(f类号】

4、R333．4【文献标志码]A[文章编号】1674-7887(2014)O1—0001—04DelayedadministrationofexogenoushydrogensulfideexacerbatesrathepatocyteinjuryinducedbylipOpOlysaccharideWANGYansha，JlYinglei，ULinlin，LIUYichangJ，GUZhenyonga(DepartmentofForensicMedicine，Medi-calSchool，NantongUniver

5、sity，Nantong226001；2DepartmentofForensicMedicine，SchoolofBiologyandBasicMedicalSciencesofSoochowUniversity)【Abstract】Objective：Toexploretheeffectofdelayedadministrationofexogenoushydrogensulfide(HzS)onrathepatocyteinjuryinducedbylipopolysaccharide(LPS)．Method

6、s：RathepatocytelineBRLcellswereculturedandtreatedwithLPS(IO~xg／mL)andH2sdonorsodiumhydrosulfide(NaHS，50，100，200Ixmol／L)respectivelyorinacombinedmannerfor12h，and1hafterLPSexposure，NariSwasaddedintocellmedium．Thecellviabilitywasevaluatedbytrypanblueexclusiontes

7、t．Thecyto-nuclearmorphologicalchangesofapoptoticcellsweredetectedbythefluorescentdyeHoechst33258．Theproteinex—pressionsofGRP78，whichisamarkerofERS，andCHOPandcaspase一12，whicharerelatedwithERSanalysedbyWest—ernBlot．Results：Comparedwiththoseofcontrolgroup，cellvi

8、abilityofBRLcellsdecreasedsignificantly；apoptosisrateofBRLcellsincreasedmarkedly；GRP78，CHOPandcaspase一12proteinexpressionsincreasedsignificantlyinLPSgroup(P<0．01)．ComparedwiththoseofLPSgr