合肥地区无偿献血者丙型肝炎病毒区段抗体表达模式分析-论文.pdf

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1、检验医学２０１４年４月第２９卷第４期ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ａｐｒｉｌ２０１４，Ｖｏｌ２９．Ｎｏ４．·３８７·文章编号：１６７３８６４０（２０１４）０４０３８７０３中图分类号：Ｒ４４６．６２文献标志码：ＡＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３８６４０．２０１４．０４．０２０合肥地区无偿献血者丙型肝炎病毒区段抗体表达模式分析１２２２２２王伦善，吕蓉，赵阳，盛琪琪，蒋菲菲，刘忠（１．中国人民解放军第１０５医院检验科，安徽合肥２３００３１；２．安徽省血液中心输血研究室，安徽合肥２３００３１）摘要：目的探讨无偿献血者丙型

2、肝炎病毒（ＨＣＶ）各区段抗体表达规律及模式，为明确各区段抗体在疾病诊断及预后分析中的可能价值提供依据。方法采用一种国产ＨＣＶ抗体酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）试剂对３４６０９例无偿献血者的１８７份ＨＣＶ抗体阳性反应标本进行复检，复检阳性标本均进行重组免疫印迹（ＲＩＢＡ）确证试验，并对结果进行统计学分析。结果无偿献血者中ＨＣＶ抗体ＥＬＩＳＡ初筛阳性反应率为５．４０‰，ＲＩＢＡ复检结果显示阳性率为０．６９‰，不确定比率为０．７８‰，ＥＬＩＳＡ假阳性率为３．９２‰，Ｓ／Ｃｏ比值与ＲＩＢＡ试验结果呈正相关性；阳性结果中以抗Ｃｏｒｅ阴性、抗ＮＳ３１阴

3、性、抗ＮＳ３２阳性、抗ＮＳ４阳性、抗ＮＳ５阴性模式出现频率最高，ＮＳ４区段抗体检出率最高，为９５．８％，而ＮＳ３２区段抗体检出率则为８７．５％；不确定结果中，以抗ＮＳ３２出现频率最高，为６６．７％，其次为抗ＮＳ４区段，不确定结果中仅见２份抗Ｃｏｒｅ抗体阳性，未见ＮＳ５区段抗体的检出。结论采用ＲＩＢＡ试验作为ＨＣＶ感染的诊断标准，本地区献血者人群中ＨＣＶ感染率为０．６９‰。抗ＮＳ３２和ＮＳ４抗体可以作为早期诊断指标，证实ＮＳ５区段抗体在无偿献血的感染ＨＣＶ患者的标本中检出频率较低。关键词：丙型肝炎病毒抗体；重组免疫印迹试验；无偿献血者丙

4、型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ，ＨＣＶ）是一ａｓｓａｙ，ＥＬＩＳＡ）呈可疑或阳性反应（包括灰区和阳种可引起慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌的主要病性）的标本１８７份。原体之一，自然转阴率低，预后不佳，病程迁延，迄二、试剂今尚无有效疫苗用于临床，因此早期明确诊断和ＨＣＶ抗体诊断试剂盒（英科新创科技有限公［１］治疗特别关键。ＨＣＶ抗体重组免疫印迹司，批号２０１００６５８１２）。ＨＣＶ抗体ＲＩＢＡ确证试（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔａｓｓａｙ，ＲＩＢＡ）确证试验剂盒ＨＣＶＢＬＯＴ３．０（ＭＰＢｉｏｍｅｄｉｃａｌｓＡｓｉａＰａｃｉ

5、ｆｉｃ结果是目前国内外最常用的确证ＨＣＶ感染的重Ｐｔｅ．Ｌｔｄ．，批号ＡＤ０００１）。要证据之一，其检测的抗体包括Ｃｏｒｅ结构区域和三、方法ＮＳ３１、ＮＳ３２、ＮＳ４、ＮＳ５等非结构区域，各区段抗１．标本收集及处理将献血者的血液标本体在丙型肝炎诊断中的价值和病程中的表达规律２４ｈ内离心分离血浆，进行ＨＣＶＥＬＩＳＡ抗体复尚无定论。本研究以未经治疗的ＨＣＶ抗体阳性检，经复查有一种试剂Ｓ／Ｃｏ值＞０．５即可视为阳的献血者为对象，对各区段抗体表达规律及其模性反应标本。收集此类标本立即放入－４０℃冰式进行观察，以期为明确各区段抗体在诊断治疗箱中保

6、存待用。和预后分析中的可能价值提供依据。２．间接ＥＬＩＳＡ检测ＨＣＶ抗体由本室严格按说明书常规操作，质量控制符合本中心质量体材料和方法系文件规定要求。一、标本来源３．ＨＣＶ抗体ＲＩＢＡ确证试验试剂膜条上分２０１０年１月４日至６月２日采自安徽省血液别包被有重组抗原Ｃｏｒｅ、ＮＳ３、ＮＳ４和ＮＳ５蛋白，中心的献血者标本３４６０９份。收集ＨＣＶ抗体酶与患者血清中相应抗体结合，经洗涤后加入碱性联免疫吸附试验（ｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ磷酸酶标记的酶标二抗反应，最后加入５溴４作者简介：王伦善，男，１９６９年生，硕士，主管

7、技师，主要从事输血传染病诊断研究。·３８８·检验医学２０１４年４月第２９卷第４期ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ａｐｒｉｌ２０１４，Ｖｏｌ２９．Ｎｏ４．氯３吲哚磷酸盐／硝基四氮唑蓝底物显色。阳四、不确定结果中各模式出现频率和单片段性、不确定和阴性结果按照试剂盒提供的标准进抗体表达分析行判读。在２７份不确定结果的血清中，以抗ＮＳ３２出四、统计学方法现频率最高，为６６．７％，其次为抗ＮＳ４区段，不确采用ＳＰＳＳ１６．０统计软件进行统计分析，采定结果中见２份抗Ｃｏｒｅ抗体阳性，均未见ＮＳ５区用Ｓｐｅａｒｍａｎ秩方法进行相关性分析，以Ｐ＜

8、０．０５段抗体的检出。见表３。为差异有统计学意义。表２阳性结果中各模式出现频率和单片段抗体表达分析结果例数组别抗Ｃｏｒｅ抗ＮＳ３１抗ＮＳ３２抗ＮＳ４抗ＮＳ５（频