微小 RNA-122在异烟肼所致小鼠抗结核药物性肝损伤中的动态变化-论文.pdf

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1、中国药理学与毒理学杂志2014年8月第28卷第4期ChinJPharmacolToxicol，Vol28，No4，Aug2014·569·微小RNA一122在异烟肼所致小鼠抗结核药物性肝损伤中的动态变化宋磊，张中瑞，贺蕾，高丽，史哲，冯福民(河北联合大学公共卫生学院，河北唐山063000)摘要：目的探讨微小RNA(miRNA)-122与抗结核药物性肝损伤的关系，为寻找抗结核药物性肝损伤的早期诊断标志物提供实验依据。方法昆明小鼠异烟肼(INH)组每日1次ig给予2mLINH(90mg·kg)，分别在连续给药1，3，5，7，14，21和28d后留取小鼠的血

2、清和肝组织标本。采用全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性，生化法检测肝组织铜锌超氧化物歧化酶(Cu／Zn-SOD)活性和丙二醛(MDA)含量，实时荧光定量PCR检测肝组织中miRNA-122表达。结果药物处理后GPT和GOT呈上升趋势，分别在14和21d后明显增加(P<0．05)；Cu／Zn-SOD和MDA分别在5d后呈下降趋势和上升趋势(P<0．05)。给药后miRNA-122呈整体下降趋势，给药3d后miRNA-122下降明显(P<0．05)，并在14d下降到最小值0．58±0．02。相关性分析结果显示，miRNA

3、-122和GPT，Cu／Zn-SOD，MDA存在相关性，相关系数分别为一0．370，0．268和一0．298。结论miRNA-122与INH所致抗结核药物性肝损伤的发生相关，且可作为INH所致抗结核药物性肝损伤的早期诊断标志物。关键词：miRNA一122；异烟肼；抗结核药物；肝损伤；氧化损伤；生物因子中图分类号：R963，R978．3文献标志码：A文章编号：1000-3002(2014)04-0569-06DOl：10．3867／j．issn．1000-3002．2014．04．015目前结核病仍然是全球灾难性疾病，据调查mRNA3非编码区(UTR)完

4、全或不完全的互补结2011年全球约有8．7万新发病例和140万死亡病合而导致相应mRNA降解或翻译抑制，从而在转录例J。在结核病临床治疗过程中，异烟肼(isonia-后水平调节基因的表达。miRNA一122是一种肝特zid，INH)是WHO推荐的一线抗结核药物，其主要异性表达的miRNA，约占肝miRNA的70％。研究不良反应是抗结核药物性肝损伤(anti—tuberculosis报道，miRNA一122与肝细胞发育、脂质代谢、肝细胞drug—inducedliverinjury，ADLI)，ADLI直接影响结应急应答、肝炎病毒感染、肝纤维化和肝癌等密

5、切相核病的治疗效果，严重者可致治疗中断或失败，甚至关，由于其具有良好的特异性、灵敏性和稳定性，造成肝坏死或死亡_2J。目前临床上仍在使用一般miRNA-122有可能可成为某些药源性肝损伤的生生化指标如谷丙转氨酶(glutamic·pyruvicransami—物标志物J。本研究采用INH诱导的小鼠ADLI，nase，GPT)和谷草转氨酶(glutamic-oxaloacetic观察miRNA一122在ADLI发展中的动态变化，探讨transaminase，GOT)等作为肝损伤的诊断指标，但miRNA-122与ADLI的关系，以期为ADLI的早期它们特异

6、性较差。有研究证实，GPT和GOT可同诊断寻找新的生物标志物。样在其他疾病中出现显著性变化。。]。因此，选择特异性高和灵敏度好的生物标志物对ADLI的早期诊1材料与方法断有重要意义。1．1药物、试剂和仪器微小RNA(microRNA，miRNA)是一类长度约INH购自沈阳制药厂(编号：1204081)，Trizol为22个核苷酸的内源性非编码的小RNA。作为对和PlatinumSYBRGreenqPCR试剂盒均购自美基因表达的负调控因子，主要通过与对应靶基因国Invitrogen公司，TaqManmiRNA逆转录试剂盒(编号：4366596)购自美国A

7、ppliedBiosystems公基金项目：唐山市重点实验室项目(08150201A一1—8)作者简介：宋磊(1987一)，女，硕士研究生，主要从事司，引物由美国Invitrogen公司合成，铜锌超氧化物传染病流行病学研究；冯福民(1963-)，男，博士，教授，主要歧化酶(Cu／Zn-superoxidedismutase，Cu／Zn—从事传染病防治研究。SOD)和丙二醛(malondiaIdehyde，MDA)试剂盒通讯作者：冯福民，E—mail：fm_feng@sina．com均购自中国南京建成公司。·570·中国药理学与毒理学杂志2014年8月第

8、28卷第4期ChinJPharmacolToxicol，Vol28，No4，Aug20141．