LipoxinA4通过调节肿瘤相关巨噬细胞对肝癌细胞株HepG2microRNA表达谱的影响-论文.pdf

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1、中国细胞生物学学报ChineseJournalofCellBiology2014，36(5)：638—643DOI：10．11844／~cb．2014．05．0324LipoxinA4通过调节肿瘤相关巨噬细胞对肝癌细胞株HepG2microRNA表达谱的影响黄婉秋马明洋程雪王褚琳苗烁吴萍拇(华中科技大学基础医学院2010级临床医学八年制，武汉430030；华中科技大学附属同济医院肝脏外科，武汉430030；华中科技大学同济医学院基础医学院病理生理学系，武汉430030)摘要肿瘤与炎症密切相关，作者以往已证实内源性促炎症缓

2、解介质脂氧素A4(LipoxinA4，LXA)能在整体和细胞水平发挥抗肝癌细胞增殖和转移的作用。为进一步探讨Lx通过调节肿瘤相关巨噬细胞对肝癌细胞株HepG2microRNAs(miRNAs)表达谱的影响该文首先提取经脂多糖(LPS)或LPS+LXA4作用24h的人巨噬细胞株U937~g-养上清液，分别称为ACM或LCM，以模拟肿瘤的炎症微环境，并用此上清液刺激HepG2~胞，24h后提取细胞总RNA，采用microRNA芯片miRCURYMLNAArray(V16．0)检测，计算各样本中~miRNAs标准值及比值。以两

3、组间Hy3荧光标记信号强度的比值≤0．5或≥2为标准判定差异表达miRNA。Real—timePCR检~Nhsa．miR．623的相对含量以验证基因芯片的结果。结果发现，与对照组细胞相比，经过ACM作用24h的HepG2~胞有35个miRNAs上调、130个miRNAs下调。LCM组与ACM组相比，HepG2细胞有185个miRNAs上调、71个miRNAs下调。Rea1．timePcI淞测的结果证实，hsa．miR．623的变化与基因芯片趋势一致。综上所述，LXA4能通过肿瘤相关巨噬细胞而间接发挥其调节HepG2~胞m

4、iRNAs表达谱的作用。关键词肝癌：微d~RNA；脂氧素EffectofLipoxinA4onMicroRNAsExpressionProfileinHepG2CellsthroughModulatingtheTumorAssociatedMacrophagesHuangWanqiu，MaMingyang，ChengXue，WangChulin。MiaoShuo。，WuPing。，(~Eight-yearProgramofClinicalMedicine，2010Session，BasicDepartmentofTong

5、fiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430030，China；2HepaticSurgeryCenter，TongfiHospital,HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430030，China；3DepartmentofPathophysiology，Ton~iMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，W

6、uhan430030，China)AbstractOnthebasisthatthepathologicprocessoftumoriscloselyrelatedtouncontrolledinflammation，wehaveprovedthatLipoxinA4(LXA4)couldinhibittheproliferationandmetastasisofHCCcellsbothinvitroandinvivo．ThisstudyfurtherinvestigatedtheindirecteffectofLipo

7、xinA4(LX)onthemicroRNA(miRNA)expres—sionprofileinHepG2cellsthroughmodulatingthetumor-associatedmacrophages．ConditionedcellculturemediafromLPS—stimulatedandLPS／LXA4CO—stimulatedU937cells，asACMandLCMrespectively,werecollected．收稿日期：2013-10—10接受日期：2014．01．20国家自然科学基金(

8、批准号：81272313)和中央高校基本科研业务费华中科技大学(批准~2012QN32、2013—3l3)资助的课题共同第一作者通讯作者。Tel：027—83692625，E-mail：wpingwp@mails．tjmueducnReceived：October10，2013Accepted：January2O，2