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《Wnt3诱导小鼠肝前体细胞上皮-间质转化-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、第二军医大学学报2013年11月第34卷第l1期http://www.ajsmmu.cn·1166·AcademicJournalofSecondMilitaryMedicalUniversity,Nov.2013,Vo1.34,No.11·论著·DOI:10.3724/SP.J.1008.2O13.01166Wnt3诱导小鼠肝前体细胞上皮一间质转化胡代曦,张锡峰,张超,钟沁。,冯涛,黄佳秭”1.重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆4000162.重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,重庆4000163.重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室,重庆400016[摘要]目的探讨w
2、nt3对小鼠肝前体细胞(14—19)发生上皮一间质转化的影响。方法分别将空载体Ad—GFP和表达wnt3的腺病毒Ad—GFP—wnt3转入小鼠肝前体细胞中,显微镜下观察细胞形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察14—19细胞迁移能力。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹分析分别检测14—19细胞中上皮标记物和间质标记物的表达改变。结果显微镜下可见高表达wnt3的14—19细胞由不规则多边形变为长梭形。细胞划痕实验和细胞迁移实验结果显示,高表达wnt3的14—19细胞迁移能力明显提高,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P3、herin、vimentin和twistl的mRNA和蛋白水平表达上调,相反上皮标记物E—cadherin的mRNA水平和蛋白水平表达下调,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论Wnt3能够促使小鼠肝前体细胞发生上皮一间质转化,提示其可能参与了肝纤维化的发展进程。[关键词]wnt3;肝前体细胞;上皮一间质转化;肝硬化[中图分类号]R329.28;R575.2[文献标志码]A[文章编号]0258—879X(2013)11-1166—05Wnt3-inducedepithelial--mesenchymaltransitioninmousehepaticprogenitorc4、ellsHUDai—xi,ZHANGXi—feng.-,ZHANGChao,ZHONGQin,FENGTao,HUANGJia-yi1.MolecularMedicineandCancerResearchCenter,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China2.DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology,CollegeofBasicMedicine,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China3.DepartmentofPathophysiol5、ogy,CollegeofBasicMedicine,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheimpactofwnt3uponepithelial-mesenchymaltransitioninmousehepaticprogenitorcells(t4—19cells).MethodsAd—GFP-wnt3virusandblankAd—GFPweretransfectedinto14—19cells;cellmorphologywasobservedundermic6、roscope.Themigrationabilityof14—19cellswasexaminedbywound—healingassayandtranswellassay.Theexpressionofepithelialandmesenchymalmarkersin14—19cellswasdetectedbyreal-timePCRandWesternblottinganalysis.ResultsMicroscopicobservationfoundthat14—19cellschangedfromanepithelialcharacteristicshapeintoaspindle7、-likeshape.Wound—healingassayandTranswellassayshowedthatthemigrationabilityof14—19cellshighlyexpressingwnt3wassignificantlyenhancedcomparedwiththeblankcontrolgroup(P<0.01).Real—timePCRandWesternblotti
3、herin、vimentin和twistl的mRNA和蛋白水平表达上调,相反上皮标记物E—cadherin的mRNA水平和蛋白水平表达下调,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论Wnt3能够促使小鼠肝前体细胞发生上皮一间质转化,提示其可能参与了肝纤维化的发展进程。[关键词]wnt3;肝前体细胞;上皮一间质转化;肝硬化[中图分类号]R329.28;R575.2[文献标志码]A[文章编号]0258—879X(2013)11-1166—05Wnt3-inducedepithelial--mesenchymaltransitioninmousehepaticprogenitorc
4、ellsHUDai—xi,ZHANGXi—feng.-,ZHANGChao,ZHONGQin,FENGTao,HUANGJia-yi1.MolecularMedicineandCancerResearchCenter,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China2.DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology,CollegeofBasicMedicine,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China3.DepartmentofPathophysiol
5、ogy,CollegeofBasicMedicine,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheimpactofwnt3uponepithelial-mesenchymaltransitioninmousehepaticprogenitorcells(t4—19cells).MethodsAd—GFP-wnt3virusandblankAd—GFPweretransfectedinto14—19cells;cellmorphologywasobservedundermic
6、roscope.Themigrationabilityof14—19cellswasexaminedbywound—healingassayandtranswellassay.Theexpressionofepithelialandmesenchymalmarkersin14—19cellswasdetectedbyreal-timePCRandWesternblottinganalysis.ResultsMicroscopicobservationfoundthat14—19cellschangedfromanepithelialcharacteristicshapeintoaspindle
7、-likeshape.Wound—healingassayandTranswellassayshowedthatthemigrationabilityof14—19cellshighlyexpressingwnt3wassignificantlyenhancedcomparedwiththeblankcontrolgroup(P<0.01).Real—timePCRandWesternblotti
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