三疣梭子蟹蜕壳后肝胰腺消化酶活力变化特征研究-论文.pdf

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1、第31卷第4期海洋学研究Vo1．31NO．42013年12月JoURNALoFMARINESCIENCESDec．，2013文章编号：1001—909X(2o13)04—0074—06三疣梭子蟹蜕壳后肝胰腺消化酶活力变化特征研究林鹏，刘华，余作奔，母昌考，宋微微，李荣华，王春琳(宁波大学海洋学院，浙江宁波31521I)摘要：消化酶是反映机体消化生理状况及对营养物质利用能力的重要指标。本文对三疣梭子蟹蜕壳后不同时间肝胰腺消化酶活力进行了研究，结果显示，蜕壳后肝胰腺中胃蛋白酶、胰蛋白酶和淀粉酶活力在第4～6天达到最高；脂肪酶活力在第6天时达到最高；纤维素酶活力

2、总体较低，在第10～12天达到最高；几丁质酶活力在蜕壳后第4天时酶活力最高。研究表明，三疣梭子蟹蜕壳后，胰蛋白酶和胃蛋白酶活力相对较高，而纤维素酶和淀粉酶活力较低，可能与三疣梭子蟹本身的肉食性特征有关；另外，整个实验期间，三疣梭子蟹肝胰腺脂肪酶活力较低，可能与测定条件有一定的关系。与其他时间点相比，蜕壳后4～6d(蜕壳周期中间阶段)各种酶活力处于较高水平，表明此阶段对食物的消化能力比其他时间更强，这为养殖过程中饵料的合理投喂提供了参考依据。关键词：三疣梭子蟹；蜕壳；肝胰腺；消化酶活力中图分类号：$968．25文献标识码：A力；胡毅等]先后报道了金属离子和N

3、aC1对三疣0引言梭子蟹消化酶活力的影响。关于蜕壳周期中消化酶蜕壳是节肢动物和其他相关物种生命周期中的活力的研究，未见相关报道。由于肝胰腺是甲壳动物必须环节l-】]，是个体正常生长的需要。蜕壳过程伴随主要的消化器官，是消化酶的主要来源。因此，本甲壳动物个体发育的始终_[2]。三疣梭子蟹蜕壳周期研究以蜕壳后三疣梭子蟹肝胰腺为材料，进行消化酶分为蜕壳后期、蜕壳间期、蜕壳前期和蜕壳期]。蜕活力变化分析，以期为三疣梭子蟹养殖过程不同阶段壳前期，三疣梭子蟹停止摄食，直到蜕壳后期重新开的营养供给提供科学依据。始摄食，期间主要依靠体内储存的物质进行能量供1材料与方法给。

4、消化酶活性是反映动物摄食、营养条件、生理状况的指标，是联系动物营养状态和生长发育的中间指1．1实验材料标，其活性的高低直接影响了动物对营养物质的吸收实验用三疣梭子蟹为宁波鑫亿鲜活水产有限公利用程度]。因此，进行蜕壳周期中三疣梭子蟹消化司人工养殖，于2012年8月获得，体重为25～30g。酶活力研究将有助于了解其蜕壳周期的营养代谢特实验期间，利用单个体筐养方式进行三疣梭子蟹人工征。潘鲁青等报道了三疣梭子蟹幼体消化酶活繁育苗种的养殖，以冷冻保存的野杂鱼为饵料，每日收稿日期：2013—04-01修回日期：2013-1卜O5基金项目：国家自然科学基金项目资助(4I

5、106123)；浙江省公益性技术应用研究计划项目资助(2011C33025)；浙江省海水养殖重点科技创新团队项目资助(2010R50025—08)；国家富民强县科技专项资助(2011F012)；浙江省水产育种专项资助(2012C12907—3)；浙江省教育厅高校科研计划项目资助(Z201121258)；宁波市农业创新创业重点项目资助(2o11c92014)；宁波市海蟹类产业科技创新团队项目资助(201IB81003)作者简介：林鹏(1989一)，女，湖南娄底市人，主要从事虾蟹养殖技术研究。*通讯作者：母昌考，副教授，E—mail：muchangkao@nb

6、u．edu．cn林鹏等：三疣梭子蟹蜕壳后肝胰腺消化酶活力变化特征研究·75·投喂量为体重的3～5(蜕壳前期停止摄食，不需变化如图2所示，蜕壳完成后三疣梭子蟹肝胰腺中投喂，蜕壳完成12h后开始投喂)。养殖过程中观察胰蛋白酶活力呈先上升后下降的趋势，蜕壳后4～6记录三疣梭子蟹的生长及蜕壳情况，分别于蜕壳完成d达到最高，到第12天(蜕壳前期)，下降到相对较后0，2，4，6，8，1O和12d(蜕壳完成至下一次蜕壳开低的水平。始前)取肝胰腺(雄雌各3只)，用液氮保存带回实验2．2三疣梭子蟹蜕壳后脂肪酶活力变化情况室进行消化酶活力测定。三疣梭子蟹蜕壳后第4天，脂肪酶活

7、力最低，而1．2测定方法到第6天时达到最高，而后降低，从第8天至第12取肝胰腺组织1g左右，按质量(g)：体积(mL)天，活性一直维持在较低水平(图3)。一1：9的比例加入4℃冷却的匀浆缓冲液，冰浴条2．3三疣梭子蟹蜕壳后碳水化合物酶(淀粉酶、纤维件下匀浆，2500r／rain离心10min，取上清液进行酶素酶和几丁质酶)活力变化情况活力测定。几丁质酶活力测定样品制备匀浆缓冲液三疣梭子蟹肝胰腺淀粉酶活力在刚蜕壳后o～2为0．1mol／LPBS(pH7．O)，其余样品处理用质量分d内处于较低水平，显著低于其他取样时间；在蜕壳数为0．9的生理盐水作匀浆缓冲液。

8、胰蛋白酶、胃后4～6d酶活力达到最高，其后又有所下降(图4)。蛋白