HGF介导Ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞钙化-论文.pdf

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1、fRo~oarchArticles822i基础研究颜建云宋艳陈燕玲周芹陆立鹤【摘要】目的研究肝细胞生成因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)在氧化型低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein，Ox—LDL)诱导的血管平滑肌细胞钙化中的作用。方法本研究采用细胞钙化体外模型，检测HGF的浓度和细胞钙化程度。结果Ox—LDL能促进血管平滑肌细胞钙化，同时上调HGF的表达水平。抑制HGF能减轻Ox—LDL诱导的细胞钙化。结论HGF参与了Ox—LDL诱导的血管平滑肌细胞钙化

2、。【关键词】血管钙化；氧化型低密度脂蛋白；肝细胞生长因子；血管平滑肌细胞HGFMediatesOx—LDL-inducedVascularSmoothMuscleCellCalcificationYANJian-yun，SONGYah，CHENYan—ling,ZHOUQinLULi—he,DepartmentofHistologyandEmbryology,SouthernMedicalUniversity,2DepartmentofPathophysiology,ZhongshanMedicalSchoolSu

3、nYat—SenUniversity,3DepartmentofAnesthesiology,ThefirstafiliatedHospitalSunYat—SenUniversiCorrespondingauthor"．LiheLu,E-mail．"lulihe@mail．sysuedu．cn[Abstract]ObjectiveTostudytheroleofHGFinOx—LDL．inducedvascularsmoothmusclecellcalcification．MethodsInvitromode1o

4、fcellcalcificationwasusedinthisstudy．HGFlevelandcalcificationweremeasuredbyELISAandalizarinredstaining．ResultsWefoundthatOx—LDLacceleratedvascularsmoothmusclecellcalcificationandup—regulatedtheexpressionlevelofHGF．InhibitionofHGFattenuatedOx—LDL—inducedcellcal

5、cification．ConclusionThesefindingssuggestthatHGFisinvolvedinOx-LDL—inducedvascularsmoothmusclecellcalcification．[KeyWords]VascularCalcification；OxidizedLowDensityLipoprotein；HepatocyteGrowthFactor；VascularSmoothMuscleCells血管钙化(vascularcalcification)是动脉粥样硬化、高血压

6、、1材料与方法糖尿病血管病变、血管损伤、慢性。肾病和衰老等疾病的共同的1．1细胞培养病理表现，属于异位钙化，同时也是心血管疾病发生率和死亡取截肢手术病人的动脉，采用explant方法分离血管平滑肌率增加的独_上危险因素以及威胁生命的严重并发症[t2]o长期以细胞]，将其置于含10％FBS的DMEM培养液中培养，每周换来血管钙化被认为是被动的钙磷矿物质沉积在血管壁的过程。液3次。用10mmol／L的p一甘油磷酸(beta—glycerophosphate，近些年来的大量研究表明血管钙化是类似骨形成的受基因主动BGP)

7、诱导血管平滑肌细胞钙化。实验分为2组：control组以调控的过程。。我们以前的实验证明：氧化型低密度脂蛋白nativeLDL处理细胞；Ox．LDL组以Ox—LDL处理细胞。(oxidizedlowdensitylipoprotein，Ox．LDL)能刺激血管平滑肌细1．2Ox-LDL的制备胞(vascularsmoothmusclecells，VSMCs)出现成骨样分化，促收集健康人的血标本，EDTA抗凝后，1500rpm离心10使血管平滑肌细胞钙化。。。。然而Ox—LDL诱导血管平滑肌细胞rain，取上层血浆。

8、加入高密度KBr溶液f1．33g／m1)调整血浆的钙化的机制尚不完伞清楚。本研究通过采用血管平滑肌细胞钙密度至1．019g／ml，4"C超高速(100，000rpm)离心5h。去掉卜层化体外模型，研究Ox—LDL诱导的血管平滑肌细胞钙化的肝细VLDL后，加入高密度KBr溶液(1．33g／m1)调整血浆的密度至胞生成因子(hepatocytegrowthfac