（浙江选考）2021版新高考生物一轮复习专题11生物技术实践第31讲微生物的利用教学案新人教版.docx

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1、第31讲　微生物的利用知识内容考试要求知识内容考试要求1．大肠杆菌的培养和分离实验与探究能力2.分离以尿素为氮源的微生物实验与探究能力　细菌的培养与分离1．微生物：结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，如酵母、细菌、蓝细菌和病毒等。绝大多数微生物与传染病无关，90%以上的微生物对人类有利。2．培养基含义微生物生存的环境和营养物质成分①水、无机盐、碳源和氮源，还需满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求②LB培养基：蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、水、琼脂(固体培养基

2、)LB培养基的作用①蛋白胨、酵母提取物：为细菌生长提供碳源和氮源；②氯化钠：维持一定的渗透压；③琼脂：凝固剂，不易分解，一般不作为营养物质。其在96℃时融化成液体，冷却到45℃以下即重新凝固种类①按物理状态分，包括固体培养基、半固体培养基、液体培养基；②按特殊用途分，包括基础培养基、加富培养基、选择培养基和鉴别培养基；③按培养不同微生物分，包括细菌培养基(pH呈中性偏碱，添加有机物如蛋白胨、酵母提取物)、霉菌培养基(pH呈中性偏酸，添加无机物或者添加蔗糖的豆芽汁)3.细菌的培养和分离细菌培养细菌

3、分离划线分离法涂布分离法细菌以分裂的方式繁殖，分裂速度很快。在培养细菌时，一般用接种环将已有细菌的培养物转移到新的培养基中。在液体培养基中，培养8h，每毫升培养基中有几亿个细菌。接种于固体培养基10～20h后，一个细菌细胞会繁殖成许多个细菌细胞，聚集在一起，形成菌落用接种环在固体培养基表面连续划线的操作。由于划线过程中，接种环上的菌液逐渐减少，因此划线最后部分先将培养的菌液稀释，通常稀释105～107倍。取0.1mL稀释度不同的菌液，加在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上，然后进

4、行培养，得到相互分开的菌落。通常以每个培养皿有20个以内的单菌落最为合适的细菌间距离加大。培养一段时间后，每一个细菌细胞产生一个菌落。再将每个菌落分别接种到试管斜面上，从而除去杂菌方法简单单菌落更易分开，但操作复杂些单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一4.灭菌操作项目灼烧灭菌高压蒸汽灭菌过滤灭菌适用材料或用具接种环、接种针或其他金属用具培养基、培养皿、试管等玻璃器具等尿素等加热会分解的物质续　表项目灼烧灭菌高压蒸汽灭菌过滤灭菌灭菌条件及时间在酒精灯火焰上

5、充分灼烧，直至烧红，冷却后备用LB培养基：121℃(1kg/cm2压力)、15min含葡萄糖的培养基：90℃以上(500__g/cm2压力)、30min玻璃器皿：高压蒸汽灭菌后放入60～80__℃的烘箱中烘干G6玻璃砂漏斗过滤5.超净工作台提前50min左右开启超净工作台，先打开紫外灯灭菌30min，然后关闭紫外灯开启过滤风，运行20min，之后超净台可以开始使用。(1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质(√)(2)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅

6、到皿盖上(×)(3)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害(√)(4)为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落(×)1．选择培养基的制作方法(1)在培养基全部营养成分具备的前提下，加入物质：依据某些微生物对某些物质的抗性，在培养基中加入该物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长，如培养基中加入高浓度食盐时可抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可将该菌分离出来；而在培养基中加入青霉素时可抑制细菌、放线菌的生长，从而分离得到酵母菌和霉

7、菌。(2)通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的：培养基中缺乏氮源时，可分离自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存；培养基中若缺乏有机碳源则异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物生存。(3)利用培养基的特定化学成分分离特定微生物：如当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物生长，使能够利用石油的微生物生长，从而分离出能消除石油污染的微生物。(4)通过某些特殊环境分离微生物：如在高盐环境中可分离耐盐菌，其他菌在盐浓度高时易失水而不能生存；在高温环境中

8、可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存。2．消毒与灭菌的辨析项目条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属工具高压蒸汽灭菌法培养基及容器3．细菌的两种分离方法的比较项目划线分离法涂布分离法工具接种环玻璃刮刀原理通过接种环在琼脂固体培