响应面法优化天蚕素抗菌肽培养条件的研究.pdf

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1、生三程食品，II钸歧Vo1．35,．N'o．03，2014响应面法优化天蚕素抗菌肽培养条件的研究张玮亮，谢鹏，秦鹏，赵培静，明飞平，梁淑娃(广州市微生物研究所，广东广州510663)摘要：目的：通过响应面分析方法对天蚕素抗菌肽培养条件进行优化。方法：以天蚕素抗菌肽生产菌株KJ05出发，使用Plaekett—Burman和响应面分析法对天蚕素抗茵肽生产菌株l(J05进行培养条件优化，结果：从8个因素中筛选出3个显著因子：葡萄糖、起始pH和接种量，优化结果为葡萄糖含量为5．7％，接种量为5．6％，起始pH为6．4，优化后培养基所产的天蚕素抗菌肽平均杀菌效价达到12852U／mL，优化后培养基在

2、500L发酵灌中所产的天蚕素抗菌肽杀菌效价达到l5520U／mL。结论：优化后结果稳定，较优化前效价提高30．7％关键词：天蚕素抗菌肽，培养基优化，响应面分析法OptimizationoffermentationconditionforcecropinsproductionsbyresponsesurfaceanalysisZHANGWei-liang，XIEPeng，Q

3、NPeng，ZHAOPei-jing，MINGFei—ping，LIANGShu—wa(GuangzhouInstituteofMicrobiology，Guangzhou510663，China)Abstract：Ob

4、jective：Responsesurfaceanalysis(RSA)wasusedtooptimizethefermentationconditionsforimprovingtheproductionofcecropins．Methods：Plackett—BurmanfactorialdesignwasappliedtoevaluatetheeffectOfeightdifferentfermentationconditionsontheproductionofcecropins—produntionstrainKJ05．andtheRSAwascarriedouttooptimi

5、zethefermentationconditions．Results：Amongthevariables，glucose，pHandinoculationamountwerefoundtobethemostsignificantvariables．Theexperimentresultsshowedthatbyusingtheoptimalconditiontheaveragetiterofcercropinsreached12852U／mL，andtheoptimalconditionwasasfolows：glucosewas5．7％．theinoculationamountwas5

6、．6％andthepHwas6．4．Theoptimalfermentationconditionsweretestedin500Lfermentor，thetiterofcecropinsreached15520U／mL．Conclusion：Theexperimentresultsshowedthatthefermentationproductionofcecropinswasincreasedby30．7％comparedwiththeunoptimizedconditions．Keywords：cecropins；conditionsoptimization：responsesur

7、faceanalysis中图分类号：TS202．3文献标识码：A文章编号：1002—0306(2014)03—0177—05抗菌肽属于生物体内诱导而产生的一种生物活目前，对抗菌肽的发酵已展开广泛的研究，近年性多肽小分子，分子量在2000～7000左右，由20～60已有报道用传统单因素法和正交设计法对天蚕素类个氨基酸残基组成⋯。抗菌肽抗菌谱比传统抗生素抗菌肽的培养基进行优化，但该方法优化出的方案广，抗菌活性高，既能抗革兰氏阳性菌和革兰氏阴具有局限性，会忽略多个因子之间的交互作用，得到性菌，又有抗真菌和病毒的作用。的方案通常不是最优方案。Plackett—Burman和响应天蚕素抗菌肽在197

8、2年首次分离得到是第一面分析法，在微生物培养条件的优化工作中取得良个被发现的动物抗菌肽，其作用机理是破坏病原菌好的效果，本研究选取8个对天蚕素抗菌肽生产菌细胞膜，从而达到抗菌作用，其作用不涉及特定靶株的相关因子进行设计，筛选出对其分泌抗菌肽显位，因此几乎不产生抗药性。比起传统抗生素，天蚕著影响因子，再采用响应面分析的方法，以产生的抗素抗菌肽具有无残留、低耐药性的特点，因此具有广菌肽杀菌效价为响应值，研究显著因子对效价的影