不同抗生素对刺槐遗传转化受体系统的影响.pdf

《不同抗生素对刺槐遗传转化受体系统的影响.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、山东农业科学2014，46(4)：31～35ShandongAgriculturalSciences不同抗生素对刺槐遗传转化受体系统的影响韩义，孙超，秦柱南，王凯，曹帮华(山东农业大学林学院，山东泰安271018)摘要：本试验研究了卡那霉素(Kana)、头孢霉素(Cef)、氨苄青霉素(Amp)、羧苄青霉素(Carb)、红霉素(E)对刺槐形成层为外植体的遗传转化受体系统的影响。结果表明：刺槐形成层诱导愈伤时Cef对受体材料伤害最小，抑菌效果最好，浓度为200ms／L时能完全抑制农杆菌生长；用Kana作为刺槐转基因植株的筛选，刺槐形成层愈伤组织分化时选择剂浓度为100～125mg／L最

2、佳，生根培养时选择剂浓度为75mg／L最佳。关键词：刺槐；遗传转化；抗生素；形成层中图分类号：$792．270．4文献标识号：A文章编号：1001—4942(2014)04—0031-05EfectsofDiferentAntibioticsonGeneticTransformationReceptorSystemofRobiniapseudoacaciaL．HanYi，SunChao，QinZhunan，WangKai，CaoBanghua(CollegeofForestry，ShandongAgriculturalUniversity，Taian271018，China)Abs

3、tractInthisresearch，theeffectsofdifferentantibiotics，kanamycin(Kana)，cefotaxime(Cef)，ampicillin(Amp)，carbenicillin(Carb)anderythromycin(E)onreceptorsystemofgenetictransformationforRobiniapseudoacaciawerestudiedwiththecambiumasexplants．TheresultsshowedthatCefhadtheminimaltoxicitytoexplantsandth

4、ebestantibacterialeffect．TheCefattheconcentrationof200mg／Lcouldcomplete-lyinhibitetheproliferationofAgrobacteriumtumefaciens．DifferentconcentrationsofKanawereusedforresist—ancescreeningofRobiniapseudoacaciatransgenicplants．Theresultsindicatedthattheoptimalconcentrationforcallusdifferentiationw

5、as100～125mg／L，andtheoptimaloneforrootingculturewas75mg／L．KeywordsRobiniapseudoacacia；Genetictransformation；Antibiotics；Cambium刺槐(RobiniapseudoacaciaL．)，适应性强，叶植物的遗传转化_2J。应用农杆菌介导法进行生长快，材质好，用途广，繁殖容易，是人工造林的植物遗传转化时，一般经过农杆菌侵染、共培养、优选树种⋯，但其有限的耐盐能力却限制其栽种选择培养、转基因植株再生等多个环节，除侵染和范围。应用基因工程技术提高刺槐耐盐性是拓展共培养外，其

6、余环节都要用到抗生素作为筛选转其用于重盐碱地区造林和绿化的重要途径。我们化体的抗性选择剂和农杆菌生长的抑制剂，因此从刺槐中克隆了定位于液泡膜的Na／H逆向转研究抗生素对遗传转化受体系统的影响是遗传转运蛋白基因RpNHX1，并构建含35S强启动子表化受体系统建立的必经环节l8J。不同种类抗生达载体pBI121一RpNHX1用于刺槐遗传转化。素抑菌效果不同，对受体材料影响也不同，因此抗在植物遗传转化的多种技术中，农杆菌介导生素种类选择和剂量方案都需要在实验中加以确的转化方法因其操作简单、转化率高、拷贝数少等定。目前遗传转化中常用的抑菌类抗生素主要有优点成为常用的有效转化方法，广泛应用于

7、双子头孢霉素(Cefotaxime，Cef)、氨苄青霉素(Ampi一收稿日期：2013—12—23基金项目：山东省良种工程课题“农业生物资源创新利用研究”[鲁农良种字(2010)117号]；国家农业成果转化资金项目(201lGB2C600024)作者简介：韩义(1987一)，男，硕士研究生，主要研究方向为林木遗传育种。E—mail：h~byq@163．corn通讯作者：曹帮华(1964一)，男，教授，博士生导师，主要研究方向为森林培育和林木遗传育种。E—mail：ca