建立银杏遗传转化受体系统的研究

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1、浙江大学硕士学位论文建立银杏遗传转化受体系统的研究姓名:张明文申请学位级别:硕士专业:果树学指导教师:陈力耕2003.5.1中文摘要f镀杏'(Ginkgo6渤施)又名鑫栗、公棼褥,是我嚣特有酶珍爨孑遗稀释,也楚目前世界上珍稀裸予植物之一,现仪存一科一属一种,素有裸予植物“活化石”之称,在植物学上其有重要麴科学价值。1980年以来,锻杏在食鼎、保健、医药、木材,绿化等领域得到广泛煦开发利用,对锻杏的繁殖和育种提出了新的要求。但怒,银杏怒雌雄异株植物,实生罄定植鼹一般需器20~30年才裁开花结果,银套常规

2、旁耱眩阙长,效率低,严重制约了昂期经济效益的提高和,圭产的发照。另外,杂交育种和实生选种时,童裁长、开蕊结果黢筵是本零果撼菇耱教夷瓣主要联麓因素。ip—一开展银杏组织培养和遗传转化,研究银香成花的分子机理,进行银杏分予育静商重要躬理论稻现实意义。涟罄现筏生锡技术裁发震,穰物组缀培养{乍为一种蘑要的研究手段取得了可喜的进步,裸予植物银密组织培养尤其困难。识蟊蔚锻杏组织培养和遗传转化的研究并不多,成功的例子还没有。建立一个锻杏的离频高效再生体系已是刻不容缓的事。1.艉杏组织培养过程中,龙其是在愈伤组织的继

3、代培养中,褐变现蒙特别严重,曾蠢不少的人傲过这方蘑黪硬究,毽部没鸯戏功,矮本磅髓过黠不蘑巍炎物质、抗氧化剂、吸附剂以及不同的培养基对褐变的影响和控制效果,探索出有效控裂竭纯魂象发生煞最佳塔莠条‰敲验纺莱表筏:MS+ZTl.Omg/L+NAAl.Omg/L+蔗糖509几十琼脂89/L+AC29月L培养綦上的继代效果最好,继代霹阉激努在i5d左右.i业,、/一,2.银杏的不同器宫和组织都能够诱导出愈伤组织来。族中,予叶期胚辘l嬲左右全部愈伤化,诱鼯速度和诱导率均最高,根则很难诱导,愈伤组织很少,褐化缀快;

4、叶片诱导的愈伤组织,生长馒,襁证也熳,在培莠基上保持嚣三个月而不褐化;胚乳的诱导时间也较长,需要30d左右。诱导的难易分别为:根段、叶片、齄疑、题壤、时援、茎段、趣毒蠡、予时。,b—7—3.限杏不同外植体对丛生芽的诱蜉不同,银杏茎段培养可以直接得到丛生芽,毽数量极少,蠢羹大部分耩于蒎芬萌发,分纯率20%左右。匈哥以莉搿银杏优良无性系的不同器官为外植体,离体培器产生愈伤组织,经务化获得丛生芽。毽是不同器富诱导豹愈痿组织对予熬生芽的诱导也是不阉瓣,予时诱导熬鑫像缀绥懿分往率较褰,蠢36%麦农,弊毽继筏次数

5、翡增热穗藐够溪鸯鬟分记豹几率.而茎殿和胚诱导的愈伤组织基本上没有丛生芽发生,这可能和不同愈伤组织的内部续构有关。成熟躯豹题状体诱导率较低,诱导撩警豳难,农N6+BAl,5mg/L+NAA0。5mg愿+蔗糖309/L+骧驻89/L+Ac29m上诱等效栗稿对\较好,可以肖i】.5%的诱姆率。j—卫一~/4.N的含量对茎段诱导根的发生搿麓缀大的影响,含量嵩不利予根熬诱导,IBA耪KT豹配合使孀稀予穰静诱罨。良赣结果表鳃,在培养蘩I/2MS+蔗糖309几+琼脂89/L+IBA0.8mg/L+KT0,5rag/

6、L+Ac29/L上诱导效果相对较好.工‘,关键词:银瓷;篱秘愈伤缀织;、≮.(延壅趸委国乏ABSTRACTGinkgobiloba。L,locallyknown8sBaiguoandGongsuntree,isspecialrareplantinChina.Atpresent,onlyonesection,onecategory,onegenusexists,soitiscalled8livingfossil”ofgymnospermandbeofvitalscientificvaluei珏botan

7、y.Ginkgobiloba.Lwasexploitedandutilizedwidelyasfoodstuff,healthcareprotection,medicine,lumberandvirescencesince1980’S,SOnewdemandwasputforwardonbreedofGinkgo.ButGinkgoisadioecoustreeandtakes20—30yearsthatitsseedlingscomeintobearing。Routinebreedingtimeis

8、verylongandi£sproductivityalsoislowSOthatitrestrictsseriouslyearlyeconomybenefitanddevelopmentofGingo.Inaddition,longjuvenileperiodandlatefruitarebecomeprimaryrestrictivefactorsincrossbreedandseedselection.Itisveryimportantintheo

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