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《aqp4在大鼠脑缺血再灌注损伤过程中作用机制_石向群》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、脑与神经疾病杂志年第卷第期在大鼠脑缺血再灌注损伤过程中作用机制石向群杨金升王运良包仕尧摘要目的探讨在大鼠脑缺血再灌注损伤过程中对脑损伤、脑水肿形成等的影响以及作用机制。方法采用大鼠复制脑局限性缺血再灌注模型,应用免疫组织化学方法检测脑内蛋白,记录大鼠神经功能缺损程、、。,度血脑屏障通透性脑水肿程度的动态变化结果脑局限性缺血再灌注损伤后脑内蛋白水平迅速降低至再,。灌注后一小时达最低水平至再灌注天时恢复到正常水平脑水肿程度峰值出现在再灌注损伤第一小时、蓝最大通透率出现在再灌注损伤第一小时。神经功能缺损最重的时间点出现在再灌注损伤的第小时。分析再灌注小
2、时伤侧半球与同时间点的神经功能缺损评分的相关性,结果显示水平与神经功能,。,缺损评分呈负相关性一一尸一。结论脑缺血再灌注损伤过程中水平的迅速下降是机体对,、。脑损伤所作出的一种保护性反应具有阻止血脑屏障破坏减轻血管源性脑水肿和细胞源性脑水肿的效应调节缺血后脑内的功能和表达水平可望成为新的治疗脑缺血再灌注损伤的靶点。关键词水通道蛋白缺血再灌注脑水肿中图分类号·文献标识码文章编号一一一,,,一,,,一夕丫,,一、,,,,,一,,①,一一一,②一一一③一,一一④即一一一,一一,脑水肿一直是神经科学研究的热点之一本研究材料与方法目的在于采用免疫组织化学方
3、法观察大鼠脑缺血再灌、,一实验动物及分组选用健康成年注损伤过程中脑内水通道蛋白水平的变化一探讨其水平的变化与脑水肿的相关性及脑卒中后脑水雄性大鼠,体重一克。大鼠分为正常、、、、、,肿形成机制,为临床治疗、研究提供有益的线索。组缺血小时再灌注小时和天组共个组,每组实验动物只。二、大鼠脑缺血再灌注损伤模型制作和成功标志作者单位兰州军区兰州总医院神经内科,杨金升苏州石向群,“二模型制作参照方法线栓法、大学附属第二医院神经内科王运良包仁尧复制大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型。模型成功脑与神经疾病杂志。洲年第卷第期、,,标志大鼠于缺血小时开始再灌注后并麻醉
4、清醒,出和健侧皮质皮质下四个部分在分析天平上秤湿重,现神经功能缺损,其评分与术前评分相差分以上者。各部分组织放人匀浆器进行匀浆匀浆液为的,未达到上述标准者视为模型制作失败,不计人实验组。三氯乙酸组织匀浆液经离心,取上清与无水,因麻醉未醒和经解剖发现存在脑蛛网膜下腔出血均视乙醇混合应用荧为模型制作失败不计人实验组。光分光光度计旧本产。一型在、,三、研究指标及检测方法的条件下进行比色依据其值计算出的浓度。依据所测得浓度计算出血脑屏障生命体征的监测经股动脉插管监测动脉血、,、,以每克湿重脑组织内所含的量压血气分析在大脑中动脉闭塞前及再灌注开始各对的通透
5、率,。,。监测一次血压持续监测肛表持续监测直肠温度手昭表示、术缺血麻醉期间通过瓦的灯泡加热维持体温在正组织处理脑组织按常规行石蜡包埋胖厚,常范围士之内。度切片裱于经多聚赖氨酸包被的清洁载玻片上再按常规进行脱蜡、复水和液漂洗,行免疫组织化学缺血再灌注损伤脑内水平应用兔抗大鼠单克隆抗体进行免疫组织化学检测大鼠检测。、脑缺血再灌注损伤后脑内水平的变化,为了便四统计分析使用统,于定量分析、减少操作误差,将显色时间统一限计软件包构建数据库并对数据进行相应的统计学分。定为。析免疫组织化学半定量分析免疫组织化学检结果,测法时每批次各选取每组一只大鼠张、、,,一
6、大鼠手术缺血过程中生命体征的变化切片进行相同条件下的染色每只大鼠共染色张切,手术中的生理学各项参数的监测结果均在正常范片批次取均值作为该大鼠的定量值进行统计学,、,以减少由于人工操作和试剂批次不同所带来的围手术前血压动脉血气等监测结果为士分析、、、误差。参照〕方法,依据染色强度和阳性士士、、目标的数量不同进行评分,评分分为一、共个等士血糖士士℃、级。每批次均以正常组的染色强度作为标准评分并定梗塞小时后上述监测结果为士、、为,稍低于正常为、中等低于正常定为、明显低于士士士、、。、,、士正常定为染色结果阴性定为。稍强于正常定为血糖士统计学分。中等强于
7、正常定为、明显强于正常定为。析检验显示其差异无统计学意义由此显示实验手术过程中大鼠生命体征平稳。脑水肿应用干湿重法测定脑缺血再灌注损、伤后不同时间点脑不同区域皮质区、皮质下区水肿二大鼠脑缺血再灌注损伤后行为学的变化的程度。依据公式脑水肿程度一湿重一干重湿本组研究发现大鼠卒中后出现明显的神经功能缺,、重,计算出脑各部分的水肿程度,以每湿重脑组损和行为学变化几乎所有卒中大鼠均出现进食减少、、,织中所含水的重量表示。体重明显减轻活动减少反应迟钝部分大鼠出现抓、,、,厂头恶心等表现少部分出现鼻粘膜眼结膜出血严重神经功能缺损评估参照的方法、、。对缺血损伤后
8、的大鼠进行神经功能缺损评分,用于从的出现抽搐昏迷死亡比较再灌注不同时间点的神,·,经功能缺损评分发现卒中后第一小时的神经功行为学方面反映
