脓毒症大鼠骨骼肌蛋白降解增强与泛素转录表达关系的研究.pdf

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1、军医进修学院学报2002Jun，2（32）AcadJPLAPostgradmedSch·81·!"!!!"!［文章编号］1005-113（92002）02-0081-05论!著!"!!!!!"脓毒症大鼠骨骼肌蛋白降解增强与泛素转录表达关系的研究柴家科，吴焱秋，盛志勇（解放军304医院烧伤研究所，北京100037）［摘要］目的：测定脓毒症大鼠骨骼肌蛋白降解率的变化，探讨骨骼肌蛋白降解的分子机制。方法：腹腔注射内毒素建立大鼠脓毒症模型，动物随机分成4组，分别为腹腔注射内毒素后2h、6h、12和24h组，每组各设正常

2、对照。借助骨骼肌充分氧供离体孵育系统，氨基酸自动分析仪测定不同时相点孵育液中伸指长肌总蛋白降解率和肌纤维蛋白降解率；应用northernbiot方法测定伸指长肌组织泛素mRNA的表达变化，分析骨骼肌蛋白降解与泛素mRNA表达的关系。结果：脓毒症大鼠伸趾长肌总蛋白降解率在2h和6h轻度增加，肌纤维蛋白降解率则在2h和6h增加1.5~2.2倍，在12h增加40%。伸指长肌组织泛素mRNA-2.4kb的水平主要在2h和6h增加明显，增幅达2~5倍，泛素mRNA-1.2kb未见明显变化；肌纤维蛋白降解与泛素mRNA-2

3、.4kb表达间呈显著正相关（r=0.9731，P=0.003）。结论：脓毒症时骨骼肌蛋白降解增加可能同泛素-蛋白酶体蛋白降解途径活性增强相关。［关键词］脓毒症；肌，骨骼；大鼠；印迹法，RNA［中图分类号］R644［文献标识码］AStudyontherelationshipbetweenproteinbreakdownandtranscriptionalexpressionofubi-guitininskeletalmuscleinratswithsepsisCHAIJia-ke，WUYan-giu，ShengZ

4、hi-yong（Burnsinstitute，PLA304thHospital，Beijing100037，China）［Abstract］Objective：TodeterminethechangesinproteoiyticrateandmRNAexpressionofubiguitininratskeietaimuscie，andin-vestigatethemoiecuiarmechanismofskeietaimuscieproteincataboiismduringsepsis.Methods：Th

5、eratswithsepsiswasestabiishedbyadministeringendotoxinintotheperitoneaicavity.Theratswererandomiydividedinto4groupsasfoiiows：2h，6h，12hand24hafteradministrationofendotoxin，16animaisforeachgroupinciuding8normaicontrois.Weusetheinvitromuscieincubationsystemwiths

6、ufficientoxygensuppiyasweiiasaminoacidautomaticanaiyzerfordetectionoftheproteoiyticrateofextensordigitoriumiongu（sEDL）muscieinthesampies.ThemRNAexpressionofubiguitininratEDLmusciewasdeterminedbynorthernbiotanaiysis.Results：TotaiproteoiyticrateinEDLmuscieincr

7、easedsiightiyat2hand6hafteradministeringendotoxinintotheperitoneaicavity，nostatisticaiiysignificantdifferencewasobservedat12hand24h，therewasaprogressive1~2-foidincreaseinmyofibriiiarproteoiyticrateat2hand6h，40%increaseat12h，respectiveiy，ascomparedwiththatofn

8、ormaicontro（iP<0.01）.UbiguitinmRNA-2.4kbroseby2~5-foidat2hand6hafteradministeringendotoxinintotheperitoneaicavit（yP<0.01），butnotat12hand24hcomparedwiththatofnormaicontroi.Therewasnostatisticaiiy