EMT与非EMT细胞在大肠癌侵袭转移中的作用-论文.pdf

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1、2014年9月基础医学与临床September2014第34卷第9期Basic&ClinicalMedicineVo1．34No．9主编点评：EMT作为肿瘤发生发展过程中特定阶段的一种病理生理学现象，已受到广泛关注和研究。韩慧霞课题组不仅观察到EMT对大肠癌侵袭转移具有作用，而且发现大肠癌中发生EMT的细胞可以加速非EMT细胞的侵袭转移速度。这一现象可能具有重要的意义，值得深入研究。文章编号：1001-6325(2014)09-1165—06研究论文EMT与非EMT细胞在大肠癌侵袭转移中的作用王雅娟，胡洁，赵海燕，韩慧霞(南

2、方医科大学病理学系，广东广州510515)摘要：目的探讨TGF一131诱导大肠癌HT29细胞发生上皮细胞间质转化(EMT)后对肿瘤细胞侵袭转移能力的影响。方法TGF-1长期诱导HT29细胞，RT—PCR检测细胞E-钙黏素和波形蛋白mRNA的表达；HE和考马斯亮蓝染色后分别观察细胞形态和骨架；对HT29、经TGF．131诱导发生EMT的HT29／TGF-131和两者混合培养的细胞分别进行划痕实验；绿色荧光蛋白标记质粒转染HT29／TGF一131细胞，红色的转染HT29细胞，两者混合培养进行划痕实验。结果TGF-131连续刺激1

3、0d后HT29的Ecadherin表达显著下降，Vimentin表达显著上调(P<0．05)；连续刺激40d后，细胞变梭，细胞间连接不紧密。细胞蓝色丝网状结构的骨架蛋白明显增多，相邻细胞问骨架连接不如刺激前紧密；细胞划痕实验显示刺激后的HT29细胞迁移速度最快，HT29细胞最慢；转染后见红色和绿色的细胞在迁移生长的过程中分布均匀。结论TGF．131可诱导大肠癌细胞发生EMT；大肠癌中发生EMT的细胞可以加速非EMT细胞的侵袭转移速度。关键词：大肠癌；TGF．131；EMT中图分类号：R735．35文献标志码：ATherole

4、softheEMTandnon—EMTcellsintheinvasionandmetastasisofcolorectalcancerWANGYa-juan，HUJie，ZHAOHai—yan，HANHui—xia(Dept．ofPathology，SouthernMedicalUniversity，Guangzhou510515，China)Abstract：0bjectiveToexplorethebiologicalbehaviorsofEMTcellsandnon—EMTcellsincolorectalcance

5、rme—tastasis．MethodsTGF一131wasusedtostimulatecoloncancercensHT29．TheexpressionofEcadhefinandVim—entinmRNAofcellswasdetectedbyfluorescencequantitativePCR．ThemorphologyandCytoskeletonofHT29andHT29／TGF-131cellswereobservedbyHEandCoomassiebluestainingrespectively，thegr

6、eenandredfluorescentproteinplasmidweretransfectedintoEMTandnon—EMTcellsrespectively，thenmixedculturingtwokindcells，doingscratchtest，observingthemovementtheofcells．ResultsAftercontinuousstimulatedbyTGF一131f0r10d，theexpressionofEcadhefinmRNAdecreasedwithsignificantst

7、atisticaldiference，theexpressionofVimentinmRNA收稿日期：2013-08-14修回日期：2014．03．28基金项目：国家自然科学基金(81272758)‘通信作者(correspondingauthor)：hhxia@fimmu．com1166基础医学与临床Basic&ClinicalMedicine2014．34(9)increasedsignificantystatistical(P<0．05)．AftercontinuousstimulationbyTGF一[31for40

8、d，HT29cellsshowedthemorphologyofwit}lspindledeclinedcell—celladhesion．HT29cellshavemoresurfaceprojections．andlesscy—toskeletalstructuresandspot—l