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时间:2020-04-07
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1、油菜籽中硫代葡萄糖昔检测技术硫代葡萄糖昔(简称硫貳或硫昔)是存在于十字花科植物屮的-•类含硫次生代谢产物,木身无毒,但在与其伴牛-存在的芥子酶的作用下,降解成有毒的异硫氧酸酯、硫孰酸盐、月青类化合物等,引起动物甲状腺肿大等,饼粕难于饲用或降低其饲用价值。因此,硫苛是油菜品质检测的重要指标。硫昔的测定方法有多种,根据被分析的对象,硫昔分析方法可分为两类:第-•类是测定硫昔降解产物,间接计算硫昔的含量;第二类是直接测定完整硫昔或其衍牛物;根据分析H的不同,硫苛的分析方法又可分为总量法和分量法:总量法是测定样品屮所有硫昔总含量,而不考虑其侧链(R-)的差异;分量法是测
2、定样品屮硫昔的每—种硫昔组份的含量,以研究样品屮硫昔组成类型的差界及不同硫昔组份的生物效应。按化学方法分类则有重量法、银盐滴定法、碘量法、比色法、色谱法和近红外光谱法。高效液相色谱法、专用速测仪法(分光光度法)和近红外光谱法是H前国内外油菜籽屮硫昔含量测定最常用的方法,下面对这三种方法作重点介绍。一、高效液相色谱法1.方法原理用70%甲醇水溶液提取硫昔,在阴离子交换树脂上纯化并酶解脱去硫酸根,反相Cw柱分离,紫外检测器检测硫代葡萄糖昔。2.仪器设备(1)分析天平(2)研钵或粉碎机(3)漩涡混合器(4)水浴锅(5)离心机(6)高效液相色谱仪3.结果表示检测结果显示
3、为色谱峰,根据标准样品对检测结果进行定性和定量换算。硫昔测定结果表示方法有三种,一是干基饼粕屮硫昔含量;二是含8.5%水杂饼粕屮硫昔含fi;三是含8.5%水杂油菜籽屮硫甘含量。该方法的优点是测定准确、可测定硫昔分量和总量,适于国家及部级质检屮心用于出据第三方公正数据的检测及詁种审定和区域试验材料硫昔含量的精确测定。缺点是仪器设备昂贵、测试费用高、条件严格,硫酸酯卿等大部分试剂及消耗品均需进口,且分离测定时问长,不适用于菜籽收购过程屮的现场快速测定。二、专用速测仪法(分光光度法)1•方法原理油菜籽屮硫昔与特异性酶和专用显色剂反应生成有特征吸收峰的有色产物,采用分光
4、光度法测定硫甘含量。2.仪器设备(1)微型粉碎机(2)芥酸硫昔速测仪3.结果表不测定结果直接显示为每克饼粕或每克油菜籽屮所含硫昔总量的微摩尔数(umol/g),结果直接读数,不需要换算。三、近红外光谱法根据光谱与硫甘含量之问的数学模型预测硫甘含量。2.仪器设备(1)近红外仪3.结果表不近红外预测结果表示与建模用油菜籽样品标准化学值表示一致。该方法是80年代后期迅速崛起的--种物理测试技术,具有分析速度快、对材料无损伤、无化学试剂污染等特点,但受测定原理的影响,适用于高含量成分的检测,在双低优质油菜屮硫昔含量的检测应用受到限制。
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