临床医学毕业论文celecoxib对乳腺癌mcf7细胞增殖和凋亡的影响.doc

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1、XX大学毕业论文Celecoxib对乳腺癌MCF7细胞增殖和凋亡的影响2014年6月25日Celecoxib对乳腺癌MCF7细胞增殖和凋亡的影响作者：代志军，王西京，刘小旭，康华峰，管海涛，刁岩，闵卫利，马小斌【摘要】H的探讨选择性环氧化fW2(cyclooxygenase2,COX2)抑制剂Celecoxib对乳腺癌MCF7细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法用不同浓度(10、20、40pmol/L)的Celecoxib处理MCF7细胞，采用四甲基偶氮卩坐蓝(MTT)法检测Celecoxib对MCF

2、7细胞增殖的影响；流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡；RTPCR法检测COX2基因表达；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测前列腺索E2(PGE2)释放水平。结果Celecoxib对乳腺癌MCF7细胞增殖的抑制作用呈吋间和剂量依赖性；Celecoxib可下调MCF7细胞COX2mRNA表达。流式细胞仪结果显示：细胞周期各吋相屮，Celecoxib各浓度组G0/G1期阻滞，S期细胞所占的比例明显减少，有明显的诱导凋亡作用。Celecoxib可明显抑制MCF7细胞PGE2释放水平。结论CelecoxibnJ

3、*有效抑制乳腺癌细胞增殖，并诱导凋亡。其机制可能与COX2表达下调、PGE2水平下降有关。【关键词】乳腺癌；环氧化酶；塞来昔布；细胞凋亡ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofselectivecyclooxygenase2inhibitorCelecoxibonproliferationandapoptosisofbreastcancerMCF7cells.MethodsMTTassaywasusedtoexaminetheproliferationo

4、fMCF7cellstreatedbydifferentconcentrationofCelecoxibafter24〜96h.FlowcytometrywasperformedtoanalyzetheapoptosisandcellcycleofMCF7cells.TheexpressionofCOX2wasmeasuredbyRTPCRmethodandlevelsofPGE2weremeasuredbyELISAmethod.ResultsTheinhibitionofproliferatio

5、nofMCF7cellsinvitrobyCelecoxibwasobserverdintimeanddosedependentmanners.CelecoxibeffectivelydownregulatedtheexpressionofCOX2・ThecellcyclewasarrestedatGO/G1,andrateofcellsinSphasewasobviouslydecreased・Celecoxibofdifferentconcentrationcouldalsoinduceapop

6、tosis,andtheapoptosisratewasrelatedtotheconcentrationofCelecoxib.LevelsofPGE2wereinhibitedbyCelecoxib.ConclusionCelecoxibinhibitsproliferationandinducesapoptosisofMCF7cells.ThemechanismmaybeassociatedwithdownregulationoftheexpressionofCOX2andinhibition

7、ofPGE2.KEYWORDS:breastcancer;cyclooxygenase;Celecoxib;apoptosis近几年来，流行病学、动物学实验以及环氧化(W2(cyclooxygenase2,COX2)在乳腺癌组织屮的表达等多方面证据［13］表明，COX2与肿瘤的发生和进展有关，血且非循体类抗炎药物通过抑制COX2表达而具有防治肿瘤的作用。但H前COX2抑制剂在肿瘤发生发展过程屮的具体作用尚不十分清楚。本研究旨在探讨COX2选择性抑制剂Celecoxib对人乳腺癌MCF7细胞增殖和凋亡

8、的影响及机制。1材料与方法1」材料与试剂人乳腺癌MCF7细胞株购自第四军医大学实验屮心。小牛血清(Gibco,USA)；RPMI1640培养基(Gibco,USA)；四甲基偶氮卩坐盐(microculturetetrazolium,MTT)(Gibco,USA)；碘化内I®(propidiumiodide,PI)(Sigma公司,USA)；RTPCR试剂盒(Ampliqon公司，丹麦)；Trizol(Invitrogcn,USA)；Celecoxib(辉瑞制药公司)；