复方清热泻火汤活性成分提取工艺研究-论文.pdf

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1、长江大学学报(自科版)2013年12月号医学下旬刊第i0卷第36期JournalofYangtzeUniversity(NatSciEdit)Dec．2013，Vo!．10No．36复方清热泻火汤活性成分提取工艺研究陈勇，王绍红(荆州市中医医院药剂科，湖北~U0／＼I434000)楼一层(武汉理工大学化学工程学院，湖北武汉430070)[摘要]目的：研究复方清热泻火汤中大黄素的最佳提取工艺。方法：采用索氏提取法、超声提取法和乙醇回流提取的方法，对复方清热泻火汤中的大黄素进行提取，确定最佳提取方法，并对最佳提取方法进行正交试验，对影响因素进行工艺参数的优选。结果：筛

2、选出最佳的提取方法为乙醇回流提取法，优选出最佳的提取工艺条件是以1O倍量85的乙醇，提取3次，每次lh。结论：优选出的工艺提取效率高、操作简便易行、工艺稳定，适合对复方清热泻火汤中大黄素进行提取。[关键词]复方清热泻火汤；大黄素；乙醇回流[中图分类号]R284．2[文献标志码]A[文章编号]1673—1409(2013)36—0¨4一o4“复方清热泻火汤”来源《会约》卷六加减，在医院临床应用多年。其中生地为玄参科多年生草本植物地黄(RehmanniaglutinosaIibosch．)的新鲜或干燥的块根¨】j，有清热凉血、益阴生津之功效l2]。李时珍对生地黄的评价

3、是：“服之百日面如桃花，三年轻身不老”[3]。大黄为蓼科(Polygonaceae)属多年生草本，根状茎及根供药用_4]，具有泻热通肠、凉血解毒、逐瘀通经的功效。用于实热便秘、积滞腹痛、湿热黄疸、血热吐衄、肠痈腹痛。复方清热泻火汤以生地、大黄为君药，配以白芷、黄芩、赤芍、防风、独活、甘草等6味药，具有清热凉血、凉血祛瘀等功效，临床上可用于治疗各种热血毒盛、发斑发疹、热毒痈疡等症状_5]。采用高效液相色谱法对中药中的有效成分进行含量测定已成为中药的质量评价和优化提取工艺的重要手段_6]。本文研究了不同提取方法对复方清热泻火汤中有效成分的影响，并对最佳的提取方法进行了

4、正交试验的优化，找出影响因素，确定最优的提取工艺]。从整体上为复方清热泻火汤的有效活性成分提取工艺建立客观、有效的方法，并为复方清热泻火汤的质量标准提供参考。1仪器与试药Waters1525BinaryHPLCpump(美国waters公司)；Waters2998photodiodeArrayDetector(美国waters公司)。AT20型分析天平(十万分之一)，旋转蒸发仪(上海亚荣科技有限公司)。KQ一300DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。甲醇等为色谱纯(Tedia公司，美国)，制样所用试剂均为分析纯。液相用水为三次重蒸水，大黄素对照品(中

5、国生物制品检定所，批号：l10756—200110)。复方清热泻火汤药材(生地、大黄、白芷、黄芩、赤芍、防风、独活、甘草)均购自安徽亳州中药材公司，经武汉理工大学化学工程学院楼一层教授鉴定为正品。2方法与结果2．1大黄素含量测定2．1．1色谱条件ZORBAXC18(250mm×4．6mm，5fm)，检测波长254nm，柱温：30~C，流动相：甲醇一0．1％磷酸溶液(80：20)，流速：1．0ml／min，进样量：20／,1引。[收稿日期]2013—08—09[作者简介]陈勇(1971一)，男，主管药师，主要从事医院药学工作。第1O卷第36期陈勇等：复方清热泻火汤活

6、性成分提取工艺研究2．1．2对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷为干燥剂减压干燥24h的大黄素对照品25mg，精密称定，置于50ml容量瓶中，加甲醇定容，制成每lml含500t~g的溶液，即得。2．1．3标准曲线的绘制分别取2．1．2中配制好的大黄素标准液1．0、2．0，4．0、6．0、8．0、10．0ml于10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，静置。即得不同浓度的对照品溶液，分别进样20Ml，于254nm波长处，测图1大黄素标准品液相色谱图定峰面积，大黄素标准品液相色谱图巧加50见图1。以峰面积()对溶液浓度(z)进行线性回归。结果回归方程为：y===380

7、02x+20866，r一0．9999。大黄素在50～500tLg／ml范围内呈良好的线性关里系，大黄素对照品浓度与峰面积标准曲线见图2。＼喧2．1．4试样中大黄素的测定取粗提鹫取物一定量于50ml容量瓶中，按标准曲线的绘制方法，依次加入试剂，定O10O200300400500容，再取lml样品溶液于10ml容量瓶浓度／(ml)中，加甲醇定容至刻度，进样20t~l，图2大黄素对照品浓度与峰面积标准曲线于254nm波长处测定峰面积，计算大黄素的含量，液相图谱见图3。2．1．5精密度实验取同一大黄素对照品溶液，在最大吸收波长处重复测定5次，记录峰面积，根据标准曲线方程得

8、到大黄素的