一株猪源致病性蜡样芽孢杆菌的分离与鉴定-论文.pdf

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1、湖南农业大学学报(自然科学版)2014年6月第40卷第3期JournalofHunanAgriculturalUniversity(NaturalSciences),Jun.2014,40(3):311-315DOI:10.13331/j.cnki.jhau.2014.03.017投稿网址:http://www.hunau.nefqks一株猪源致病性蜡样芽孢杆菌的分离与鉴定赵振宇h,戴荣四h,刘东友,邓治邦,李润成,尹崇(1.湖南农业大学a.动物科学技术学院;b.动物医学院,湖南长沙410128;2.澳大利亚皇家病理学院质保所,新南威尔士2052)摘要:无菌采集流行性腹泻

2、耐过仔猪的肝脏样本,经无氧及有氧培养获得一株疑似蜡样芽孢杆菌的纯培养物,命名为HN1203。16SrDNA序Y1](GenBank登录号为JX294967)分析表明,HN1203为蜡样芽孢杆菌群第7基因型菌株。生化鉴定结果表明,该菌的生化特性符合蜡样芽孢杆菌群成员的特征。药敏试验和伴孢晶体蛋白检测结果表明,该菌对链霉素和四环素敏感,对青霉素不敏感,其芽孢不形成伴孢晶体。多位点序列分型(MLST)检测结果表明,该菌带有蜡样芽孢杆菌看家基因pta新的等位基因pta153,序列基因型为ST611。毒素基因的PCR检测结果表明,该菌携带肠毒素基因(hbl、nhe和entFM)和细

3、胞毒素K基因(cytK)。综合以上结果,分离菌为一株新的蜡样芽孢杆菌,且提示分离培养蜡样芽孢杆菌时,不宜采用常用的有氧条件。进一步动物试验结果表明,该分离菌株能够致死实验小白鼠。提示生产实践中应该重视监控猪源致病性蜡样芽孢杆菌的潜在危害。关键词:仔猪;蜡样芽孢杆菌;流行性腹泻;分离;鉴定中图分类号:$852.616文献标志码:A文章编号:1007—1032(2014)03—0311—05IsolationandcharacterizationofapathogenicBacilluscereusfromapigletwithdiarrheaZHAOZhen—yu,DAIR

4、ong—si,LIUDong—you,DENGZhi.bang,LIRun—cheng。,YINChong(1.a.CollegeofAnimalScienceandTechnology;b.CollegeofVeterinaryMedicine,HunanAgriculturalUniversity,Changsha410128,China;2.RoyalCollegeofPathologistsofAustralasiaQualityAssurancePrograms,NewSouthWales2052,Australia)Abstraet:Throughaerobi

5、candanaerobiccultivation,purecultureofabacterialstrainnamedHN1203suspectedtobeBacilluscereus.cereus)wasisolatedfromliversampleofapigletrecoveredfromseverepost—weandiarrheasyndrome.Analyzingof16SrRNAsequence(GenBankaccessionnumberJX294967)ofHN1203showedthisstrainbelongstotype7ofBacilluscer

6、eusgroup.BiochemicalidentificationindicatedbiochemicalcharacteristicsofHN1203areaccordwiththatofthestrainsofB.cereusgroup.Drugsusceptibilitytestingandparasporalcrystalproteintestshowedthatthisstrainwassensitivetotetracyclineandstreptomycin,resistanttopenicillin,andnoparasporalcrystalwasfo

7、rmedonthesporeofHN1203.Multilocussequencetyping(MLST)assaysrevealedanewalleleofhouse—keepinggenepta,whichwasassignedanewsequencetype(ST)of611.PCRdetectionshowedHN1203harborsvirulence—codinggeneshblCDA,nheABCandentFM.TheseresultsshowedHNI203isanowB.cereusstrain,andis

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