广谱半胱氨酸蛋白酶抑制剂减轻小鼠噪声性耳聋的体内研究

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1、·597·ChineseJournalofOtologyVo1．11，No．4，2013●基础研究广谱半胱氨酸蛋白酶抑制剂减轻小鼠噪声性耳聋的体内研究郑宏伟韩琳沙素华余力生1北京大学人民医院(北京100034)2美国南卡莱罗那大学听力研究所(查尔斯顿29425)【摘要】目的通过动物实验验证广谱半胱氨酸蛋白酶抑制剂(ZVAD)是否可以保护耳蜗毛细胞免受噪声损害。方法选取三月龄健康小鼠，分为无噪声暴露组(DMSO)、单纯噪声暴露组(DMSO+Noise)及噪音+zVAD(zVAD+N0ise)组。依照动物体重计算

2、，按照1．5mg／kg，噪音+ZVAD动物经腹腔注射ZVAD五次，其余组动物相同时间点腹腔注射DMSO作为对照。动物经噪声暴露后，于噪声暴露后一小时处死取耳蜗基底膜铺片，在激光共聚焦显微镜下照片，检测活性半胱氨酸蛋白酶8(caspase8)和caspase9的表达，或于噪声暴露后两周行听力检测，观察ZVAD对噪声所致耳聋的影响。结果噪音暴露后耳蜗外毛细胞中活性caspase8和caspase9的表达明显增强，腹腔注射ZVAD可明显抑制两种活性caspase的表达增强。同时对于噪声引起的小鼠听力下降(ABR阈移

3、16KHz：52．5+6．1dB和32KHz：51．8+6．9dB)，腹腔注射ZVAD有一定的保护作用(ABR阈移16KHz：37．3+9．8dB和32KHz：39．5~10．5dB)，ABR检测注射ZVAD的噪音暴露小鼠18KHz及32KHz听力阈移均较单纯噪音暴露组明显减小(P<0．05)。结论ZVAD对噪声所致小鼠听力下降有一定的保护作用。【关键词】噪声性聋；半胱氨酸蛋白酶；细胞凋亡；毛细胞【中图分类号】R764．433【文献标识码】A【文章编号】1672—2922(2013)04—597—05Pan-

4、CaspaseInhibitorProtectedMouseAgainstNoiseInducedHearingLOSSzHENGHongwei，HANLinsHASuhua。YULizhengCorrespondingauthorl，ULishengE—mailyulish68@163．com【Abstract】ObjectiveTostudytheeffectsofPan—caspaseinhibitor(ZVAD)onthenoiseinducedhearinglOSS．MethodsMicewered

5、ividedintocontrolswithoutnoiseexposure．noiseonlyandnoiseplusZVADthreegroups．EachanimalreceivedatotaloffiveIPinjectionsofZVADatafinalconcentrationof1．5mg／kg．ABRmeasurementwasdonetoevaluatetheprotectiveeffectofZVADtonoiseinducedhearingloss．Thencleavedcaspase一

6、8andcaspase一9weredetectedthroughsurfaceprepara．tionsamplesandevaluatedunderlaserconfocalmicroscope．ResultsNoisetreatmentinducedasignificantincreaseinexpres—sionofcleavedcaspase一8caspase一9inOHCsonsurfacepreparationsandtreatmentwithZVADsignificantlyreducedthe

7、lev．elofnoise—inducedcleavedcaspase一8andcaspase一9，Twoweeksafternoiseexposure．theABRthresholdshiftsofcontrolswithoutnoiseexposure，noiseplusDMSO(vehicleofZVAD，thresholdshift：16KHz，52．5~6．1dB；32KHz，51．8~6．9dB)，andnoiseplusZVAD(thresholdshift：16KHz，37．3~9．8dB；3

8、2KHz，39．5~10．5dB)treatmentgroupsdifferedsignificantlyandthetreatmentwithZVADsignificantlyreducedNIHLatboth16kHZ(P<0．05)and32kHZ(p<0．05)．ConclusionPan—caspaseinhibitorZVADblocksnoise—inducedactivationof