酿酒酵母对特定底物脱卤机制的研究-论文.pdf

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1、第28卷第2期齐鲁工业大学学报VolJ28No．22014年5月JOURNALOFQILUUNIVERSITYOFTECHNOLOGYMav．2014文章编号：1004—4280(2014)02-0040-03酿酒酵母对特定底物脱卤机制的研究焦安浩，张松(齐鲁工业大学食品与生物工程学院，山东济南250353)摘要：酿酒酵母能够还原2．氯乙酰乙酸乙酯中的顺式和反式的羰基酯。在手性的还原过程中能够进行脱卤的酶对乙酰乙酸乙酯的还原竞争性由细胞质中的谷胱甘肽进行调节。脱氯是由谷胱甘肽体系中尚未确定的谷胱甘肽产生的脱卤酶催化的。第一步反应是谷胱甘肽亲和取代来取代氯原子，然后另一个

2、谷胱甘肽产生脱卤酶来催化硫醚键的断裂。是两个电子转移到细胞质中形成谷胱甘肽氧化物。这个反应是由真菌在有氧的情况下催化完成的，也是一个由谷胱甘肽介导的微生物还原脱卤的例子。关键词：酿酒酵母；2一氯乙酰乙酸乙酯；谷胱甘肽；脱卤酶中图分类号：Q939文献标识码：AResearchstatussummaryofhalohydrindehalogenaseJIAOAn—hao，ZHANGSong(SchoolofFoodandBioengineering，QiluUniversityofTechnology，Jinan250353，China)Abstract：Saccharom

3、ycescerevisiaeiscapableofreducing2-chloro-acetoacetateincisandtransestercarbonylgroup．Inthereductionprocesscanbecarriedinthehandofdehalogenationenzymereductionofethylacetoacetatecompetitivecytoplasmicglutathioneadjusted．Dechlorinationisdeterminedbytheglutathionesystem，yetproduceglutathio

4、neenzymaticdehalogenation．Thefirststepofthereactionisglutathioneaffinitytoreplacechlorineatomssubstituted，thenanotherdehalogenasetoproduceglutathionedisulfidebondcleavagecatalyzed．Twoelectrontransferisformedinthecytoplasmglutathioneoxide．Thisreactionismadeinthecaseofaerobicfungifinishedc

5、atalyst，isamicroorganismoftheglutathione—mediatedreductivedehalogenationexamples．Keywords：Saccharomycescerevisiae；2-chloro-acetoacetate；Glutathione；Dehalogenase底物浓度依赖性竞争脱卤反应能够得到5，(图1)。0引言反应条件没有明确的指明，因此反应也没有更进一步的研究。接着Cabon_3等人在有针对性的对脱卤研究表明，2．氯乙酰乙酸乙酯通过微生物转反应进行研究的时候也遇到了同样的问题。对于这化⋯过程从1到6(图1)

6、是我们最新的研究方向。个问题都没有进行进一步的研究，但是作者讨论了由于这种情况只能够通过生物转化来进行，通过酿一种涉及NAD自由基_4的机制。在改善微生物还酒酵母的生物转化来达到最好的转化结果。能够看原脱卤的选择性过程中添加乙酰乙酸乙酯时，发现到竞争性的反应。但是Hamdani等人首次报道了脱卤反应程度明显的降低了。收稿日期：2014一O1—23基金项目：山东省博士后创新项目(200903077)作者简介：焦安浩(1988一)，男，山东省日照市人，齐鲁工业大学在读硕士研究生，研究方向：生物制药第2期焦安浩，等：酿酒酵母对特定底物脱卤机制的研究4l0oH02stepsco

7、zEH3C∞zNHlone。potC1ClsynthesiscH3C‘Cl1260HCO2EI一C02Et+∞z叭CIC1Cl200H八／c0EtHcH3c裔＼／／c。2叭4图1通过对细胞质中细胞毒性的研究表明，脱卤反间在20min左右。但是在反应过程中并没有乙酰应与谷胱甘肽的生物应力相关联，因此细胞质具有乙酸乙酯的生成，即使加人过量的谷胱甘肽乙酰乙高还原能力。在脱卤反应中谷胱甘肽和谷胱甘肽转酸乙酯的生成量也小于1％。当在体外进行实验室移酶来共同催动反应。使用谷胱甘肽转移酶催化速率比未使用谷胱甘肽转谷胱甘肽转移酶催化是一种常见的微生物脱卤