罗汉果胚性愈伤组织的诱导及植株再生-论文.pdf

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1、广东农业科学2014年第12期33罗汉果胚性愈伤组织的诱导及植株再生莫海萍,李伯林,苏玉卿,李凤英(1.广西师范大学生命科学学院/珍稀濒危动植物生态与环境保护省部共建教育部重点实验室,广西桂林541004;2.桂林高新区伯林生物技术有限责任公司,广西桂林541004)摘要:为建立罗汉果高频再生体系,以无菌萌发种子的子叶为外植体,对胚性愈伤组织的诱导及植株再生进行研究。结果表明,不同6一BA与2,4一D或NAA配比均能诱导罗汉果子叶形成愈伤组织,诱导率为100%,但NAA比2.4一D更有利于罗汉果胚性愈伤组织的诱导。诱导子叶胚性愈伤组织的最

2、适培养基为MS+6一BA1.0mg/L+NAA0.5ms/L.诱导率为76%。罗汉果胚性愈伤组织为淡黄色或黄色,结构松散,呈颗粒状。2.0mg/LTDZ能有效促进不定芽的分化,分化率为83-3%。组织细胞学观察发现,子叶胚性愈伤组织通过器官发生途径再生植株。随着愈伤组织表面逐渐转绿。其内部细胞首先分化形成维管组织,然后出现瘤状结构的外表面。在瘤状结构内靠近表层的部位有多个分生细胞中心,分生细胞中心向外分化形成不定芽。关键词:罗汉果;子叶;胚性愈伤组织;不定芽;组织细胞学中图分类号:$567.23;Q813.1+2文献标识码:A文章编号:1

3、004—874X(2014)12—0033—04Embr~yon"iccCallusindOucti0nandplantlet·‘..●●·●●0re~enerati0n0IZrattta~rosvenOrllMOHai—ping,LIBo-lin,SUYu-qingz,LIFeng-ying(1.CollegeofLifeSciences,GuangxiNormalUniversity~KeyLaboratoryofEcologyofRareandEndangeredSpeciesandEnvironmentalProtectionua

4、ngxiNormalUniversity),n如ofEducation,Guilin541004,China;2.GuilinNationalNewandHi—techZoneBolinBiotechnologyCo.,Ltd,Guilin541004,China)Abstract:Theeffectsofdifferentkindsandconcentrationsofhormonesonembryoniccallusinductionandplantletregenerationwerestudiedbyusingtheaseptic

5、seedling’ScotyledonfromtheseedsofSiraitiagrosvenoriiasexplantsforsettinguptheeffectiveregenerationsystem.Theresultsindicatedthatthecallusinductionratereached100%underthedifferentproportionof6一BAand2,4一Dor6一BAandNAA.NAAwasmoresuitablethan2,4一Dforembryoniccallusinduction.Th

6、eoptimummediumforembryoniccallusinductionwasMS+6一BA1.0ms/L+NAA0.5ms/L.andtheinductionratereached76%.Thefriable,granular,lightyelloworyellowembryoniccalluswasselected.TheoptimumconcentrationofTDZfordifferentiationofadventitiousbudswas2.0mg/L,withthedifferentiationrate83.3%

7、.Histo—cytologicalobservationshowedthatregeneratedplantswereproducedviaorganogenesis.Thevasculartissuewasformedfirstlyininnerlayerofembryoniccalluswhenthesurfaceofembryoniccallusturnedgreen.Manyvesselswereobservedinthegreennodule.Withfuaherdevelopment。multiplemeristamicce

8、nterscouldbefoundinareaofnearsurfaceandtheydevelopedadventitiousbudsfinally.Keywords:Siraitiagro

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