颗粒蛋白前体缺陷型小鼠的鉴定及Ⅱ型胶原诱导颗粒蛋白前体缺陷型小鼠关节炎模型的建立-论文.pdf

《颗粒蛋白前体缺陷型小鼠的鉴定及Ⅱ型胶原诱导颗粒蛋白前体缺陷型小鼠关节炎模型的建立-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、CHINESEJOURNALOFANATOMYVo1．37No．42014解剖学杂志2014年第37卷第4期颗粒蛋白前体缺陷型小鼠的鉴定及Ⅱ型胶原诱导颗粒蛋白前体缺陷型小鼠关节炎模型的建立张鹏L。韩晓凤。夏飞。李美玲。郭风劲。△(重庆医科大学基础医学院，1细胞生物学及遗传学教研室，2发育生物学与模式动物平台，重庆400016)摘要目的：探讨一种简单、有效、快捷的方法来提取颗粒蛋白前体(PGRN)基因敲除(PGRN一)小鼠的DNA以及基因的鉴定方法，同时建立鸡Ⅱ型胶原诱导PGRN一小鼠的关节炎模型，从形态学、组织学等多角度观察和鉴定鸡Ⅱ型胶原诱导的PGRN

2、小鼠关节炎模型的特点。方法：将PGRN一小鼠与野生C57BL小鼠进行交配，产仔后6周再将杂合小鼠进行交配产仔，剪尾约0．5～1cm，提取组织DNA，在PCR体系中设计两对引物，一对用来鉴定野生C57BL／6小鼠，另一对用来鉴定PGRN一的纯合小鼠。将鸡Ⅱ型胶原与弗氏完全佐剂(cFA)等体积混合后通过尾部皮下注射PGRN一小鼠和野生C57小鼠。野生C57BL对照组小鼠和PGRN实验组小鼠分别进行鸡Col1诱导15周后取其病变腿组织进行阿尔新蓝和茜素红染色，腿组织切片进行苏木精一伊红染色，并进行相关统计学分析。结果：成功鉴定出PGRN_，一纯合小鼠；成功建立

3、鸡Ⅱ型胶原诱导的PGRN一小鼠关节炎模型。结论：PGRN一小鼠对Ⅱ型胶原诱导关节炎的易感性高于野生小鼠。本研究为临床关节炎的研究与治疗提供了很好的动物模型。关键词颗粒蛋白前体；基因敲除小鼠；鸡Ⅱ型胶原；关节炎IdentificationofprogranulindeficientmiceandconstructionofarthritismodelinducedbycollagenⅡinprogranulindeficientmiceZhangPeng，HanXiaofeng，XiaFei一，LiMeiling，GuoFengjin'△(1．Depart

4、mentofCellBiologyandGenetics，2．CoreFacilityofDevelopmentBiology，ChongqingMedicalUniversity，Chongqing400016，China)AbstractObjective：ToinvestigateasimpleandefficientDNAextractionmethodofthePGRNmiceanditsidentification，withtheestablishmentofthechickentypeIcollagen-inducedPGRN卜micemo

5、delofarthritis，modelfeaturesofchickentype1Icollagen-inducedPGRN一micearthritiswereobservedandidentifiedinmorphological，histologicalandothermulti-angleobservations．Methods：PGRN一一micewerematedwithwildcommonC57BLmice．Heterozygousmicewerematedsixweeksaftercalving，andDNAwasextractedfro

6、mthe0．5-1cmtails．ThereweretwopairsofprimersinthePCRsystem．OnewasforidentificationofwildnormalC57BLmice，andtheotherforPGRNmice．ChickenCol1，mixedinequa1volumeswithFreund’Scompleteadjuvant(CFA)，weresubcutaneouslyinjectedtOthePGRN一一miceandwildcommonC57BLmicethroughthetail．Thecontrolg

7、roupwasinjectedwithanequalamountofPBS．After15weeksofchickenColIIinduction，thelesionlegsofcontrolgroupsandtreatmentgroupswerestainedbyAlcianblueandAlizarinred．Andthelegtissueswerealsostainedbyhematoxylin-eosimThenstatisticalanalysiswasperformed．Results：ThePGRN一miceweresuccessfully

8、identifiedandPGRNmicearthritismodelweres