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时间:2020-04-22
《颗粒蛋白前体缺陷型小鼠的鉴定及Ⅱ型胶原诱导颗粒蛋白前体缺陷型小鼠关节炎模型的建立-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、CHINESEJOURNALOFANATOMYVo1.37No.42014解剖学杂志2014年第37卷第4期颗粒蛋白前体缺陷型小鼠的鉴定及Ⅱ型胶原诱导颗粒蛋白前体缺陷型小鼠关节炎模型的建立张鹏L。韩晓凤。夏飞。李美玲。郭风劲。△(重庆医科大学基础医学院,1细胞生物学及遗传学教研室,2发育生物学与模式动物平台,重庆400016)摘要目的:探讨一种简单、有效、快捷的方法来提取颗粒蛋白前体(PGRN)基因敲除(PGRN一)小鼠的DNA以及基因的鉴定方法,同时建立鸡Ⅱ型胶原诱导PGRN一小鼠的关节炎模型,从形态学、组织学等多角度观察和鉴定鸡Ⅱ型胶原诱导的PGRN
2、小鼠关节炎模型的特点。方法:将PGRN一小鼠与野生C57BL小鼠进行交配,产仔后6周再将杂合小鼠进行交配产仔,剪尾约0.5~1cm,提取组织DNA,在PCR体系中设计两对引物,一对用来鉴定野生C57BL/6小鼠,另一对用来鉴定PGRN一的纯合小鼠。将鸡Ⅱ型胶原与弗氏完全佐剂(cFA)等体积混合后通过尾部皮下注射PGRN一小鼠和野生C57小鼠。野生C57BL对照组小鼠和PGRN实验组小鼠分别进行鸡Col1诱导15周后取其病变腿组织进行阿尔新蓝和茜素红染色,腿组织切片进行苏木精一伊红染色,并进行相关统计学分析。结果:成功鉴定出PGRN_,一纯合小鼠;成功建立
3、鸡Ⅱ型胶原诱导的PGRN一小鼠关节炎模型。结论:PGRN一小鼠对Ⅱ型胶原诱导关节炎的易感性高于野生小鼠。本研究为临床关节炎的研究与治疗提供了很好的动物模型。关键词颗粒蛋白前体;基因敲除小鼠;鸡Ⅱ型胶原;关节炎IdentificationofprogranulindeficientmiceandconstructionofarthritismodelinducedbycollagenⅡinprogranulindeficientmiceZhangPeng,HanXiaofeng,XiaFei一,LiMeiling,GuoFengjin'△(1.Depart
4、mentofCellBiologyandGenetics,2.CoreFacilityofDevelopmentBiology,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China)AbstractObjective:ToinvestigateasimpleandefficientDNAextractionmethodofthePGRNmiceanditsidentification,withtheestablishmentofthechickentypeIcollagen-inducedPGRN卜micemo
5、delofarthritis,modelfeaturesofchickentype1Icollagen-inducedPGRN一micearthritiswereobservedandidentifiedinmorphological,histologicalandothermulti-angleobservations.Methods:PGRN一一micewerematedwithwildcommonC57BLmice.Heterozygousmicewerematedsixweeksaftercalving,andDNAwasextractedfro
6、mthe0.5-1cmtails.ThereweretwopairsofprimersinthePCRsystem.OnewasforidentificationofwildnormalC57BLmice,andtheotherforPGRNmice.ChickenCol1,mixedinequa1volumeswithFreund’Scompleteadjuvant(CFA),weresubcutaneouslyinjectedtOthePGRN一一miceandwildcommonC57BLmicethroughthetail.Thecontrolg
7、roupwasinjectedwithanequalamountofPBS.After15weeksofchickenColIIinduction,thelesionlegsofcontrolgroupsandtreatmentgroupswerestainedbyAlcianblueandAlizarinred.Andthelegtissueswerealsostainedbyhematoxylin-eosimThenstatisticalanalysiswasperformed.Results:ThePGRN一miceweresuccessfully
8、identifiedandPGRNmicearthritismodelweres
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