海泡石吸附固定化猪胰脂肪酶-论文.pdf

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1、第l2卷第3期生物加工过程V01．12No．32014年5月ChineseJournalofBioprocessEngineeringMav2014doi：10．3969／j．issn．1672—3678．2014．03．007海泡石吸附固定化猪胰脂肪酶王欢，胡集钺，李亚，韩萍芳(1．南京工业大学生物与制药工程学院，南京211800；2．上海市尚德实验学校，上海201315)摘要：以海泡石作为猪胰脂肪酶(PPL)的固定化载体，考察采用物理吸附的方法制备固定化脂肪酶的条件。结果表明：在固载时间4h、反应磷酸盐(PBS)溶液pH6．0、反应

2、温度25℃时，可达最大比酶活309U／g，固定化酶的化学稳定性和热稳定性均较高。同时利用红外谱仪(FT—IR)和扫描电子显微镜(SEM)的分析手段对固定化猪胰脂肪酶试样进行分析，进一步确定了海泡石材料在固定化酶中的作用。关键词：固定化；猪胰脂肪酶；海泡石中图分类号：Q814．2；TQ424．24文献标志码：A文章编号：1672—3678(2014)03—0037-05PorcinepancreaticlipaseimmobilizedonsepioliteWANGHuan，HUJicheng，LiYa，HANPingfang(1．Col

3、legeofBioteehnologyandPharmaceuticalEngineering，NanjingTechUniversity，Nangjing211800，China2．ShanghaiShangdeExperimentalSchool，Shanghai201315，China)Abstract：Theporcinepancreaticlipase(PPL)wasimmobilizedonsepiolitebyphysicalabsorption．Resultsshowedthattheadsorbedmaximumact

4、ivity(309U／g)wasobservedundertheconditionsofimmobilizationtimeof4h，reactivephosphatesolutionofpH6．0，andreactiontemperature25℃．TheimmobilizedPPLshowedexcellentadaptabilityathigherpHandbetterthermalstabilitycomparedwithfreePPL．Meanwhile，Fouriertransforminfraredspectrometer

5、(丌一IR)，scanningelectronmicroscopy(SEM)wereusedtoanalyzeexperimentresults．Resultsconfirmedtheeffectsofsepioliteinexperimentsoflipaseimmobilization．Keywords：immobilization；porcinepancreaticlipase；sepiolite作为生物催化剂，酶在～[业、医药、农业和食品廉价的载体引起了人们的重视。海泡石具有截面等各个领域有着广泛的应用J。在资源、能源短缺积为0

6、．36nm×1．06nm的管状贯穿通道及高达和环境不断恶化的今天，酶促转化已被提到相当重900m／g的理论表面积。在通道和孔洞中可以要的战略高度。但是，游离酶在实际使用过程中吸附大量的水或极性物质，包括低极性物质，因对环境十分敏感，同时很难从反应体系中被分离回此，海泡石具有很强的吸附能力。由于海泡石收和重复利用，这些缺点是酶促反应产业化的技术具有以上这些特点，使之具备作催化剂载体的良瓶颈。为了克服这些问题，在20世纪60年代，酶好条件。固定化技术应运而生且快速发展起来。脂肪酶(1ipase，EC3．1．1．3，甘油酯水解酶)是随着对酶固

7、定化技术研究的深人，探索高效一类特殊的酯键水解酶，能分解生物产生各种天然收稿日期：2012—12—12基金项目：国家重点基础研究发展计划(973计划)(2009CB72470)；江苏省普通高校研究生科研创新计划(CXZZ12_0440)作者简介：王欢(1988一)，女，山东招远人，硕士研究生，研究方向：生物酶固定化及催化；韩萍芳(联系人)，教授，E-mail：hpf@njtech．edu．cn38生物加工过程第l2卷油脂，主要水解由甘油和C12原子以上的长链脂肪1．5酶活的测定酸形成的甘油三酯。其重要特征是在异相系统在100mL的三角瓶

8、中加入2gi乙酸甘油酯、(油一水)界面上水解特殊酯(脂肪酸甘油酯)类作为50mL去离子水、10mLpH为7．0的缓冲液，磁力搅重要的工业用酶被广泛应用于食品、制革、饲料洗拌器搅拌10min制备成乳浊液。当溶