高效液相色谱法测定烧伤儿童血浆头孢曲松的含量-论文.pdf

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1、天津药学TianjinPharmacy2014年第26卷第3期实验研究高效液相色谱法测定烧伤儿童血浆头孢曲松的含量于和，孙燕燕，陈双璐(天津市儿童医院，天津300074)摘要目的：建立测定烧伤儿童血浆头孢曲松的血药浓度的高效液相色谱法。方法：色谱柱：EdipseXDB—C柱(250mm×4．6mm，5m)；流动相：甲醇一1％乙胺水溶液(磷酸调pH至7．5)(21：79)；流速：1．0ml／min；进样量：10I；检测波长：274nm；以头孢畎辛为内标。结果：血浆中头孢曲松浓度在7．378～573．5g／ml范

2、围内线性关系良好，回归方程为：Y=0．004X+0．0189(r=0．9994)，血浆中头孢曲松的最低检测浓度为7．378g／ml。结论：该方法专属性强、准确灵敏、操作简便，适用于头孢曲松血药浓度监测和药动学研究。关键词高效液相色谱法，烧伤，头孢曲松，血浆浓度中图分类号：R927．2文献标识码：A文章编号：1006-5687(2014)03-0001-03头孢曲松(ceflriaxone)是半合成的第三代头孢菌2．1色谱条件色谱柱：EdipseXDB—C．柱素。临床用于治疗敏感致病菌引起的脓毒症、脑膜炎、(2

3、50mm×4．6mm，5m)；柱温：30oC；检测波长：274腹部感染、骨、关节、软组织、皮肤及伤口感染、肾脏及nm；流动相为甲醇一1％三乙胺水溶液(磷酸调pH至泌尿道感染、呼吸道感染尤其是肺炎、耳鼻喉感染、生7．5)(21：79)；流速：1．0ml／min；进样量：10l。殖道感染等取得显著疗效。由于头孢曲松具有广谱强2．2溶液的制备效、耐酶低毒、组织穿透力强及消除半衰期长(6～8h)2．2．1头孢曲松对照品溶液的制备精密称取头孢等特点，一直作为／DJL烧伤外科抗感染的治疗药物。曲松对照品36．32mg，置

4、于1Oml量瓶中，加流动相溶为探讨烧伤感染发生率与头孢曲松合理应用的关系，解并稀释至刻度，即得浓度为3632g／ml的对照品母本文参照国内外文献报道，运用HPLC法对血浆中头液，置于冰箱中，冷藏备用。孢曲松进行含量测定，并对其进行方法学的系统研2．2．2头孢呋辛内标溶液的制备精密称取头孢呋究]。辛10．69mg，置于10ml量瓶中，加流动相溶解并稀释1仪器与试药至刻度，摇匀，即得浓度为1069g／ml的内标母液。1．1仪器Aglient1100型高效液相色谱仪(脱气器；置于冰箱中，冷藏备用。两元泵；自动进样器

5、；VWD检测器，BootpServer色谱2．3血浆样本的处理血浆自然解冻后，立即精密T作站)，EdipseXDBA—C色谱柱(2501Tim×4．6吸取血浆样品200l置2ml的聚塑离心管中，精密加mill，5m，Agilent)，S：Q一500DE型超声波清洗器(昆入流动相50l，精密加入内标溶液50l，精密加纯化山市超声仪器有限公司)，Mette,rToledoXS105电子分水200l和二氯甲烷600Ixl，混匀，使用高速离心机转析天平(瑞士，MetterToledo公司)，Thermo离心机速100

6、00r／min离心5rain，取上清液10l进样。(SORALLLengendMicrol7)，Scientifcicindustries涡旋2．4专属性试验取空白血浆200Ix1置2ml聚塑离器(美国，型号G560E)。心管中，加入流动相100l，按“2．3”项下操作，按1．2试药头孢曲松对照品(中国药品生物制品检定“2．1”项下色谱条件进样分析，记录色谱图。取空白血所，批号130480—200903)，头孢呋辛对照品(中国药浆200Ixl置2ml聚塑离心管中，加人头孢曲松和内标品生物制品检定所，批号130

7、493—201105)，甲醇(色头孢呋辛溶液各50l，按“2．3”项下操作，按“2．1”项谱纯，美国Merk公司)，磷酸(色谱纯，天津市光复精下色谱条件进样分析，记录色谱图。取血浆样品200细研化T研究院)，三乙胺(色谱纯，天津市元立化工l置2ml聚塑离心管中，加入内标溶液50l，流动相有限公司)，二氯甲烷(色谱纯，天津市康科德科技有50l，按“2．3”项下操作，按“2．1”项下色谱条件进样限公司)。分析，记录色谱图，见图1。在上述色谱条件下，空白2方法与结果血浆、空白血浆添加头孢曲松及内标头孢呋辛，儿童血收

8、稿日期：2014-02-272天津药学TianjinPharmacy2014年第26卷第3期浆样品的色谱图如图1所示。头孢曲松和头孢呋辛的性杂质对测定无干扰。保留时间分别为7．414min和15．005min，血浆中内源51An5ill-．加O1．头孢曲松2．内标物头孢呋辛图1空白血浆(A)空白血浆添加头孢曲松及内标头孢呋辛(B)血浆样本(C)I-IPLC色谱图2．5线性关系考查取空白血浆2500I