PCR方法检测花生油掺假研究-论文.pdf

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1、56粮食与油脂2014年第27卷第6期PCR方法检测花生油掺假研究王德莲，覃芳芳，曾国权，聂炎炎，陈立坚(广州质量监督检测研究院，广东广州510110)摘要：采用常规PCR方法和实时荧光PCR方法对花生油中掺入的大豆油和棕榈油进行检测。以5％～5O％的体积百分比将大豆油和棕榈油掺入到花生油中进行检测，当掺入的大豆油和棕榈油比达到10％时，实时荧光PCR和常规PCR均能检测到大豆和棕榈的内源基因，且重复性和特异性较好。在该研究中，实时荧光PCR方法和常规PCR方法在灵敏度方面并没有显著差异。关键词：花生油；掺假；PCR方法StudyonPCRdetection

2、ofpeanutoiladulterati0nWANGDe—lian，QINFang-fang，ZENGGuo-quan，NIEYan-yan，CHENLi-jian(GuangzhouQualitySupervision＆TestingInstitute，Guangzhou510110。Guangdong，China)Abstract~ThepeanutoilblendedwithsoybeanoilandpalmoilwasdetectedbyPCRandreal-timefluorescencePCRmethods．Thepercentagebyvol

3、umeof5％一50％ofsoybeanoilandpalmoilmixedwithintopeanutoil，whenmixedwith10％ofsoybeanoilandpalmoil，theendogenousgenescanbedetectedbyreal—timefluorescencePCRandPCR．Themethodsshowedgoodrepeatabilityandspecificity．Inthisstudy，therewasnotsignificantlydifferencebetweenreal—timefluorescenceP

4、CRmethodandPCRmethodinthesensitivity．Keywords：peanutoil；adulteration；PCR中图分类号：TS227文献标识码：A文章编号：1o08—9578(2014)O6—0056一O4植物油掺假问题一直是人们普遍关心的食品安市；棕榈籽样品由华南农业大学林学院提供。全问题之一，也是近年来食品掺假问题研究的热点之1．2主要试剂与仪器一。植物油由于受品种、产量、生产成本和消费习惯等DNA提取试剂盒：WizardGenomicDNAPurification因素的影响，价格差异较大。导致一些不法商贩将低Kit，W

5、izardMagneticDNAPurificationSystemfor价值的植物油掺入到高价值植物油中，如在花生油中Food，Promage公司)；TE缓冲液、异丙醇、PCR反掺入大豆油、棕榈油等，以此牟取暴利。这种行为严应体系中的buffer、dNTP、DNA聚合酶：TAKARA，重扰乱了市场秩序，同时也严重损害了消费者以及合所用引物和探针由Invitrogen公司合成。3-30K离心法经营者的利益。机：SIGMA公司；DK-8D电热恒温水槽：上海精宏近年来，关于植物油真伪鉴定的技术主要有色谱实验设备有限公司；HS501D往复式震荡机：IKA公分析法n

6、、光谱分析法、原子转换质谱法b、核磁共司；Sartorius电子天平：北京赛多利斯天平有限公司；振法等。由于食用油的化学成分随产地、季节和品AIO超纯水仪：MILLIPORE公司；Smartspecplus核种的变化而变化，依靠分析单一化学组分很难鉴别真酸蛋白分析仪：BIO-RAD公司：eppendorf移液器：伪。而基于DNA分析的分子生物学方法根据不同物德国艾本德公司；ABI7300实时荧光PCR仪：美国种具有的不同基因型对物种进行鉴定，该方法可以有AB公司。效避免理化方法带来的困扰。目前对于花生油真伪鉴1．3DNA提取方法定的报道相对较少，覃文等采用实

7、时荧光PCR定油料DNA提取：采用Promega公司的Wizard性定量检测到了混合油脂中花生油的基因成分。GenomicDNAPurificationKit试剂盒，按照说明提取本研究主要采用常规PCR方法和实时荧光PCR大豆种子及棕榈籽的DNA，为得到高质量的DNA，可方法对花生油中掺入的大豆油和棕榈油成分进行检测，在操作说明书抽提步骤之后再加入酚仿进行进一步并对两种方法的检测的准确度和灵敏度进行了比较，建抽提。提取的DNA用TE溶解，通过核酸蛋白分析仪立了花生油中掺入大豆油和棕榈油有效的检测方法。测定DNA浓度。1材料与方法分别将大豆油、棕榈油和花生油按

8、体积百分比为1．1材料5％、10％、20％、30％、