LMP-1基因转染骨髓间充质干细胞的LIM矿化蛋白表达-论文.pdf

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1、中国组织工程研究第78誊第23筋2014—06—04出版ChmeseJournalofTissueEngineeringResearchJune4，2014VoL78，No．23www．CRTER．orgLMP．1基因转染骨髓间充质干细胞I~(／LIM矿化蛋白表达金夏生’，王子江’，向川(山西医科大学第二医院，’骨科，骨关节科，山西省太原市030001)文章亮点：文章的特点主要观察LMP．1基因对骨质疏松性骨髓间充质干细胞的影响。结果表明重组LMP-1基因成功导金夏生，男，1987年生，山西省夏县人，汉族，2014入骨质疏松性大鼠骨髓间充质干细胞基因

2、组中，并使得骨髓间充质干细胞重LMP一1mRNA和蛋白的表达明显年山西医科大学毕业，硕提高。对LMP．1基因治疗骨质疏松性大鼠的体内实验提供一定的参考价值。士，医师，主要从事骨质关键词：疏松症研究。于细瞧：骨髓干细瞧：骨髓闯充覆于窖函瞻：去势大鼠：LIM矿亿蛋白1基因：反转录病毒；转染：骨质疏松dohl0．396issn2095-4344主题词：201423．005于细瞻：阃质于缅瞻：逆转录病毒科：骨质疏松【htp：／／www．crterorg】摘要中图分类号：R3942背景：体外实验提示LMP一1基因可提高骨质疏松性骨髓间充质干细胞LMP-1蛋白的

3、表达。文献标识码：B目的：用含有LIM矿化蛋白1基因的反转录病毒载体(RV-LMP．1．GFP)转染骨质疏松性SD大鼠骨髓间充质文章编号：2o95-4344方法：随机取翟雌性骨SD大鼠12只，采用双侧卵巢切除法建立骨质疏松性大。鼠模型，另取6只大鼠仅切除卵巢⋯(2⋯014⋯)2受3⋯-：。⋯。。．∞。周围等量脂肪组织，保留卵巢为假手术组。喂养2个月后取双侧股骨、胫骨、肱骨分离培养其骨髓问充质干细胞。均取3代培养细胞随机分为去势组、LMP一1转染组(转染LMP．1基因)和假手术组。分别行RT-PCR及Western．BIot检测各组细胞LlM矿化蛋白1

4、mRNA和蛋白的表达。结果与结论：培养出骨质疏松性SD大鼠骨髓间充质干细胞，转染后倒置荧光显微镜下可见绿色荧光表达；3组细胞均可在基因及蛋白水平表达LlM矿化蛋白1。与假手术组及去势组比较，LMP·1基因转染组的LIM．1mRNA和蛋白的表达均升高显著(P<0．O5)，假手术组与去势组之间差异无显著性意义(P>0．05)。成功实现重组RV-LMP．1．GFP基因在骨质疏松性SD大鼠骨髓间充质干细胞中mRNA和蛋白水平的表达，且LMP．1的表达水平显著提高。结果表明重组LMP-1基因成功导入骨质疏松性大鼠骨髓间充质干细胞基因组中，并使得LMP．1mRN

5、A和蛋白的表达明显提高。金夏生．王子江~Y／／．LMP-1基因转染骨髓间充骚于缅跑的uM矿化蛋白表这中萤组织I程研究。2014．18(23)：3633-3638．LIMmineralizationproteinexpressioninLIMmineralizationprotein-1gene-transfectedbonemarrowmesenchymalstemcellsJinXia．sheng’，WangZi-jiang’，XiangChuan(’DepartmentofO~hopedics，DepartmentofBoneJointSecon

6、dAffiliatedHospitalofShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001，ShanxiProvince，China)AbstractBACKGROUND：／nvitroexperimentssuggestthatLIMmineralizationprotein-1(LMP-1)genecanincreasetheexpressionofLMP．1proteininosteoporoticbonemarrowmesenchymaIstemcells．OBJECTlVE：TOinvestigatetheLMP-

7、1expressioninosteoporoticbonemarrowmesenchymalstemcellstransfectedwithRV-LMP-1一GFP／nvitro．METH0DS：TwelveSDfemaleratswereselectedandsubjectedtobilateraIovariectomyforestablishmentofosteoporosismodels．After2monthsoffeeding，bilateraIfemurs，tibiae，andhumerIofratsweretakentoisolatea

8、ndculturebonemarrowmesenchymaIstemcells．Passage3cellsw