HPLC-荧光法测定人血浆中厄贝沙坦浓度-论文.pdf

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1、河北医药2014年6月第36卷第11期HebeiMedicalJournal，2014，Vol36JunNo．111733doi：10．3969／j．issn．1002-7386．2014．11．058·药物研究·HPLC．荧光法测定人血浆中厄贝沙坦浓度周霞瑾齐惠珍张俊贞王明霞常青【摘要】目的建立人血浆中厄贝沙坦浓度的HPLC．荧光测定方法。方法以替米沙坦为内标，乙醚一二氯甲烷(7：3)提取的方法处理血浆。色谱柱为DiamonsilC18，流动相为水一乙腈(57：43)，磷酸调pH值=3．O0，荧光激发波长为254tim，发射

2、波长为371nm，流速为1．0ml／min，柱温为室温。进样量50l。结果厄贝沙坦和替米沙坦的保留时间分别为6．1min和4．3rain，在0．05—5m1范围内厄贝沙坦检测浓度线性关系良好(r=0．9996)，最低检测浓度为0．023g／ml。高、中、低3种浓度(4、0．8、0．08mL)的平均相对回收率分别为(101．18±6．31)％、(102．22±5．32)％、(98．45±3．52)％，提取回收率为(78．05．4-6．66)％，日间、日内RSD均小于10％。样品3次冻融及在一20℃冰箱长期放置稳定性良好。结论本实

3、验建立的方法准确、灵敏度和特异性高，可用于厄贝沙坦的药代动学和药物相互作用研究【关键词】厄贝沙坦；替米沙坦；HPLC；荧光检测法；血药浓度【中图分类号】R917【文献标识码】A【文章编号】1002—7386(2014)11—1733—02厄贝沙坦为一类新型的非肽类血管紧张素Ⅱ受体内标：替米沙坦；进样量：50IXl；该色谱条件下厄贝沙ATI的拮抗药，降压效果好，不良反应少，且有保护靶坦和替米沙坦的保留时间分别为6．0min和4．2min，器官作用，临床上广泛用于高血压的治疗J，厄贝沙厄贝沙坦和替米沙坦分离效果良好。空白血浆和加入

4、坦服用后疗效个体差异较大，临床需注意个体化给药。内标和标准品的血浆，按血浆样品的处理方法处理后本文在反复比较文献的基础上，建立了人血浆中厄贝进样。空白血浆的内源性物质对药物和内标物无干沙坦的HPLC．荧光检测法，该法准确、灵敏度和特异性扰。见图1。高，杂峰干扰少，可用于厄贝沙坦的药代动力学和药物相互作用的研究。I材料与仪器1．1仪器Waters高效液相色谱仪，474荧光检测器，5l5泵，Empower色谱数据工作站；SANYO低温冰—L箱；ZH．2涡旋混合器(天津药典标准仪器厂)；800型⋯r了下_l==『—离心机(上海分析仪

5、器厂)。图1J巳贝沙坦的高效液相色谱图A．替米沙坦标准品(5g／m1)；B．厄贝沙坦标准品(5g／m1)；C．空白1．2药品与试剂替米沙坦标准品(LotNoT一8949，血浆；D．空白血浆+替米沙坦(5g／m1)；E．空白血浆+厄贝沙坦标准美国Sigma—Aidrich公司)，厄贝沙坦标准品(批号：品(5g／m1)+替米沙坦内标(5g／m1)；1．替米沙坦；2．厄贝沙坦100607-200301，中国药品生物制品检定所)，厄贝沙坦2．2对照品溶液的配制精密称取(避光称量)干燥片(赛诺菲安万特杭州制药有限公司，规格：至恒重的厄贝

6、沙坦对照品，置于1Oml容量瓶中，加0．15g／片，批号：0A020)，试验用水为多效蒸馏水，乙5瑚1甲醇溶解，然后用蒸馏水定容至刻度，配成腈为色谱纯，乙醚、二氯甲烷、磷酸为分析纯。100Ixg／ml储备液，置4~C冰箱避光保存。临用前用2方法与结果50％甲醇将厄贝沙坦储备液按适当比例稀释，制成浓2．1色谱条件_2色谱柱：DiamonsilC18柱(4．6mm度为10ml的厄贝沙坦对照品溶液。×200mm，5m)，流动相：水：乙腈(57：43)，用磷酸2．3内标溶液的配制_4精密称取干燥至恒重的替调pH值为3．00，流速：1．

7、0ml／min，柱温：室温；荧光米沙坦对照品，置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解，配检测波长：激发波长为254llm，发射波长为371nm_3；成浓度为100g／ml的内标储备液，于4~C冰箱保存。临用时取0．5ml于10ml容量瓶中，用甲醇稀释，得项目来源：河北省医学科学研究重点课题计划(编号：20100443)5ml的内标溶液。作者单位：050011石家庄市，河北医科大学第四医院药剂科(周霞瑾、齐惠珍、张俊贞、王明霞)；河北医科大学药学院(常青)2．4血浆样品的处理分别精密量取替米沙坦内通讯作者：王明霞，050011河北医科

8、大学第四医院；标溶液401和人血浆400IXl，置于10ml玻璃离心管E-mail：mxiawang@yahoo．com．CI'I—中，涡旋混匀，加磷酸溶液(1mol／L)100Ixl，涡旋20s，河北医药2014年6月第36卷第11期HebeiMedicalJoumal，2